CCCP (羰基氰化物间氯苯腙) 是一种强效的线粒体氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡(apoptosis)发生。CCCP 诱导 PINK1 激活,促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。
分子量 | 204.62 |
分子式 | C9H5ClN4 |
CAS号 | 555-60-2 |
中文名称 | 细胞凋亡诱导剂 |
溶解性 | DMSO ≥ 25 mg/mL |
储存条件 | -20°C, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
CCCP (羰基氰化物间氯苯腙) 是一种质子离子线粒体解偶联剂,其增加膜对质子的渗透性,导致线粒体膜电位的破坏。CCCP 诱导 PINK1 激活,促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。当分别以110和35nM的浓度使用时,它抑制线粒体呼吸和ATP酶活性。当在RAW 264.7细胞中以50μM的浓度使用时,CCCP抑制干扰素基因(STING)刺激的激活,降低下游STING靶标(包括IFN-β,TBK1和IRF3)的表达。它以依赖于GTP酶Drp1的方式诱导线粒体分裂。CCCP也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用。CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1或者JC-10来进行相关研究。
使用方法
1. CCCP(10 mM)按照10-50µl的小量分装,冻存在-20℃,避免反复冻融。
2. 对于大部分的细胞培养体系,可按照200×稀释起始浓度(如5µl起始母液加入1ml细胞培养液,也就是50µM)进行凋亡诱导20分钟,随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测,呈绿色荧光。
注意:对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需参考相关文献资料决定。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 4.8871 mL | 24.4355 mL | 48.8711 mL |
5 mM | 0.9774 mL | 4.8871 mL | 9.7742 mL |
10 mM | 0.4887 mL | 2.4436 mL | 4.8871 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。