Nivolumab 别名：BMS-936558, ONO-4538, MDX-1106；Opdivo; 纳武单抗
Nivolumab（纳武单抗，纳武利尤单抗）是一种完全的人源化抗PD-1的IgG4单克隆抗体。具有免疫检查点抑制活性和抗肿瘤活性；MW：143.597 KD。（适用于人源小鼠）。
CAS No.：946414-94-4
Mol Cell Probes. 2023 Sep 28;72:101925.
CD3ζ as a novel predictive biomarker of PD-1 inhibitor resistance in melanoma
化学性质/溶解性/储存
| CAS号 | 946414-94-4 |
| 中文名称 | 纳武单抗；纳武利尤单抗 |
| 储存条件 | Store at -20°C or -70°C. Avoid multiple freeze-thaws. |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
生物活性
体外研究：Nivolumab与PD-1以高亲和力结合（Kd=2.6 nM），阻止其与B7-H1和B7-DC的相互作用。它能有效地抑制PD-1和其配体的相互作用，体外试验证明nivolumab能有效增强T细胞反应、在混合淋巴细胞反应、超级抗原或巨细胞病毒刺激化验中增强细胞因子的产生。应用FACS来检测CHO细胞中PD-1的配体结合情况的实验中，nivolumab抑制PD-1与PD-L1或PD-L2结合的效力相似（IC50值相似，分别为1.04 nM和0.97 nM）。Nivolumab与PD-1特异性结合，而不与其他免疫球蛋白超家族蛋白如CD28、CTLA-4、ICOS和BTLA作用。在低浓度下(∼1.5 ng/mL)，Nivolumab在存在T细胞受体刺激的情况下，可增强T细胞反应活性。然而，在缺少抗原或T细胞受体刺激的情况下，nivolumab没有刺激效果。在未受刺激的全血中，Nivolumab不会引起炎性因子（包括IFNγ, TNFα, IL-2, IL-4, IL-6或IL-10）的显著释放。Nivolumab也不会造成非特异性淋巴细胞的激活。
体内研究：Nivolumab在患者中耐受性良好，在具有晚期实体肿瘤的患者中，没有达到剂量限制性毒性，还没有确定最大耐受量。目前检测到的其在体内的半衰期为12-20天，它占据PD-1受体的药代动力学效果甚至可延长至85天。所以Nivolumab具有生物持久性。在猴子中，血清中nivolumab具有相对较慢的清除率和有限的血管外分布。给药浓度为1 mg/kg时，在男性和女性中Nivolumab的Mean apparent terminal elimination half-life类似，分别为124和139小时。给药浓度为10 mg/kg时，nivolumab在男性体内的平均半衰期为261小时。尽管在猴子中nivolumab看似没有毒性作用，但在人类临床试验中观察到了其毒性作用。在临床I期试验中，nivolumab安全性良好。副作用与ipilimumab类似，尽管发生率较低，严重性较低，副作用包括胃肠道的、内分泌和皮肤毒性以及肺部炎症。肺炎只在具有PD-1缺陷的MRL遗传背景的小鼠中出现，而没有在其他遗传背景的PD-1缺陷型小鼠中观察到。
（适用于人源小鼠）
实验参考
| 细胞系 | PBMCs |
| 方法 | 在巨细胞病毒-再刺激模型中，用感染了CMV的细胞溶解产物刺激从CMV阳性受试者中分离到的PBMCs，在试验开始时，加入系列稀释的nivolumab。4天后，收集上清液，检测IFNγ。 |
| 浓度 | 0-10 μM |
| 处理时间 | 4天 |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
| 动物模型 | Cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis) |
| 配制 | 生理盐水 |
| 剂量 | 3 mg/kg 或 10 mg/kg |
| 给药处理 | i.v. |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
延伸阅读 （仅做信息扩展，不作实验参考）
一、Nivolumab（BMS-936558）的作用原理
免疫检查点是免疫系统中用于调节T细胞活性的分子机制，其主要功能是防止免疫反应过度，维持免疫耐受。免疫检查点分子包括CTLA-4、PD-1、PD-L1等。在众多免疫细胞亚群中，细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）是直接杀伤肿瘤的关键效应细胞。肿瘤细胞表面往往会高表达PD -L1，并通过PD-L1与CTL表面的PD-1结合，抑制CTL的杀伤功能。Nivolumab（纳武单抗，BMS-936558，AbMole，M6100）是一种靶向PD-1的免疫球蛋白G4单克隆抗体。Nivolumab 能够结合PD-1，阻断PD-1/PD-L1信号轴，解除免疫抑制，使CTL重新获得对肿瘤细胞的识别和杀伤能力。此外，Nivolumab还能够影响辅助性 T 细胞（Th）亚群的平衡，Nivolumab可促进Th1型细胞因子的分泌，增强细胞免疫应答，同时抑制Th2型免疫反应，减少免疫抑制环境的形成。这种机制有助于打破肿瘤微环境中的免疫抑制状态，使免疫系统更有效地攻击肿瘤细胞[1]。
图 1.免疫检查点及其抑制剂[2]
二、Nivolumab（BMS-936558）的研究应用
Nivolumab（纳武利尤单抗，BMS-936558，AbMole，M6100）可用于多种肿瘤的抑制，例如黑色素瘤、非小细胞肺癌（NSCLC）、头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）、食管癌、肝细胞癌[3]。Nivolumab也是联合抑制策略研究中常用的生物活性分子，例如Nivolumab 与伊匹木单抗（Ipilimumab，一种 CTLA-4 抑制剂）的联合应用在黑色素瘤治疗中取得了显著成果[4]。在肺癌研究中，Nivolumab 与多种抑制剂之间都表现出了协同增效的作用，例如Nivolumab联合Cisplatin（顺铂）的抑制方案，较单一处理组显著延长了非小细胞肺癌小鼠的生存曲线[5, 6]。此外，Nivolumab与其他靶向抑制剂如小分子酪氨酸激酶抑制剂的联合研究也在进行中。通过同时阻断肿瘤细胞的多个关键信号通路以及激活免疫系统，有望进一步提高抑制效果[7, 8]。2014年，AbMole的两款抑制剂分别被西班牙国家心血管研究中心和美国哥伦比亚大学用于动物体内实验，相关科研成果发表于顶刊 Nature 和 Nature Medicine。
三、范例详解
Mol Cell Probes. 2023 Dec;72:101925.
西南医科大学，清迈大学的研究团队在上述文章中发现了黑色素瘤对PD-1抑制剂耐药的新型生物标志物。研究表明，CD3ζ在PD-L1阴性（IHC PD-L1(−)）的黑色素瘤细胞中显著下调，低表达CD3ζ与较差的预后、更低的肿瘤免疫浸润水平以及对PD-1抑制剂（如Nivolumab）的耐药高度相关。通过体内外实验，实验人员进一步证实：补充CD3ζ可增强Nivolumab对耐药黑色素瘤的杀伤效果。由AbMole提供的Nivolumab（纳武单抗，BMS-936558，AbMole，M6100）在上述实验中起到了重要的作用，实验人员通过逐步增加Nivolumab浓度的方式处理B16–F10细胞，建立Nivolumab耐药细胞系（B16–F10R）。
图 2. Increase CD3ζ can potentiates anti-PD-1 treatment efficacy[9].
参考文献及鸣谢
[1] G. Losurdo, D. Angelillo, N. Favia, et al., Checkpoint Inhibitor-Induced Colitis: An Update, Biomedicines 11(5) (2023).
[2] A. Naimi, R. N. Mohammed, A. Raji, et al., Tumor immunotherapies by immune checkpoint inhibitors (ICIs); the pros and cons, Cell communication and signaling : CCS 20(1) (2022) 44.
[3] S. Yust-Katz, E. Dudnik, E. Perlov, et al., P13.10 Intracranial response to nivolumab in NSCLC patients with untreated or progressing CNS metastases, (suppl_4) (2016) iv71-iv71.
[4] 张珉, 钟武等, 临床药物治疗杂志, 黑色素瘤治疗新组合——Nivolumab和Ipilimumab, (2017).
[5] The Luc Ma, Stephanie Daignault, Jessica Waninger, et al., The impact of BRAF mutation status on clinical outcomes with single-agent PD-1 inhibitor versus combination ipilimumab/nivolumab, 38(15_suppl) (2020) 10024-10024.
[6] Wei Chi, Lianyong Zhang, Xue Wang, et al., Effects of Nivolumab and Ipilimumab on the suppression of cisplatin resistant small cell lung cancer cells, (4) (2022) 40.
[7] David Aggen, Meredith Mckean, Nehal Lakhani, et al., 661Initial results from a phase 1a/b study of IK-175, an oral AHR inhibitor, as a single agent and in combination with nivolumab in patients with advanced solid tumors and urothelial carcinoma, 10(Sup2) (2022) 1.
[8] Yann Alexre Vano, Réza Elaidi, Mostefa Bennamoun, et al., Nivolumab, nivolumab-ipilimumab, and VEGFR-tyrosine kinase inhibitors as first-line treatment for metastatic clear-cell renal cell carcinoma (BIONIKK): a biomarker-driven, open-label, non-comparative, randomised, phase 2 trial, (5) (2022) 23.
[9] Z. Zhang, D. Zhang, F. Wang, et al., CD3ζ as a novel predictive biomarker of PD-1 inhibitor resistance in melanoma, Molecular and cellular probes 72 (2023) 101925.
其他相关的PD-1/PD-L1产品
参考文献
[5] Boning Liu, et al. MAbs. Acid-induced aggregation propensity of nivolumab is dependent on the Fc
以上参考文献由AI整理，仅供参考，AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。
