Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Kit细胞凋亡检测试剂盒 别名：Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
AbMole Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Kit细胞凋亡检测试剂盒可用于检测悬浮细胞和贴壁细胞的凋亡，区分处于不同凋亡时期的细胞。
产品介绍
AbMole Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Kit细胞凋亡检测试剂盒可用于检测悬浮细胞和贴壁细胞的凋亡，区分处于不同凋亡时期的细胞。
Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生凋亡时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻到膜表面，而被荧光染料 PE 标记的 Annexin V 结合，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。
由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，而 7-氨基放线菌素 D（7-Amino Actinomycin D, 7-AAD）可与双链 DNA 特异性结合并产生强烈的荧光，与 Annexin V 搭配使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。
流式细胞仪检测时 Annexin V-PE 可用 PE 通道，7-AAD 选择 PerCP/Cy5.5 通道。
检测细胞凋亡效果如下所示：
Jurkat 细胞用 5 μM 喜树碱 Camptothecin (左图) 或未加药 (右图) 处理 4 h，本试剂盒染色后流式检测。Annexin V-PE 单阳细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-PE和 7-AAD 双阳细胞为坏死或晚期凋亡细胞，7-AAD 单阳细胞为裸核细胞。
保存条件
2-8℃避光保存，一年有效。Annexin V-PE不可冷冻。
注意事项
1. 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 检测贴壁细胞时，需收集诱导凋亡后产生的悬浮细胞，并与后续收集的贴壁细胞一起检测。
3. 应尽量避免消化贴壁细胞带来的机械损伤。同时，胰酶的消化液中应尽量不含 EDTA，因为 EDTA 会影响 Annexin V 与磷脂酰丝氨酸的结合。
4. 如果使用含 EDTA 的胰酶，收集细胞后应充分清洗，确保 EDTA 被去除干净。
5. 为获得准确试验结果，染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
6. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于 1 小时内完成检测。
实验参考
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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