Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Kit细胞凋亡检测试剂盒

AbMole Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Kit细胞凋亡检测试剂盒可用于检测悬浮细胞和贴壁细胞的凋亡，区分处于不同凋亡时期的细胞。

Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生凋亡时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻到膜表面，而被荧光染料 PE 标记的 Annexin V 结合，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。

由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，而 7-氨基放线菌素 D（7-Amino Actinomycin D, 7-AAD）可与双链 DNA 特异性结合并产生强烈的荧光，与 Annexin V 搭配使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。

流式细胞仪检测时 Annexin V-PE 可用 PE 通道，7-AAD 选择 PerCP/Cy5.5 通道。

检测细胞凋亡效果如下所示：

Jurkat 细胞用 5 μM 喜树碱 Camptothecin (左图) 或未加药 (右图) 处理 4 h，本试剂盒染色后流式检测。Annexin V-PE 单阳细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-PE和 7-AAD 双阳细胞为坏死或晚期凋亡细胞，7-AAD 单阳细胞为裸核细胞。

保存条件

2-8℃避光保存，一年有效。Annexin V-PE不可冷冻。

注意事项

1. 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 检测贴壁细胞时，需收集诱导凋亡后产生的悬浮细胞，并与后续收集的贴壁细胞一起检测。

3. 应尽量避免消化贴壁细胞带来的机械损伤。同时，胰酶的消化液中应尽量不含 EDTA，因为 EDTA 会影响 Annexin V 与磷脂酰丝氨酸的结合。

4. 如果使用含 EDTA 的胰酶，收集细胞后应充分清洗，确保 EDTA 被去除干净。

5. 为获得准确试验结果，染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。

6. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于 1 小时内完成检测。