Sulfo-SMCC sodium 别名：4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐
Sulfo-SMCC sodium（4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐）是一种常用的异双功能交联剂，是不可降解的 ADC linker，其带有N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯和马来酰亚胺基团，可分别与伯胺和巯基反应。
CAS No.：92921-24-9
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 436.37 |
| 分子式 | C16H17N2NaO9S |
| CAS号 | 92921-24-9 |
| 中文名称 | 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 |
| 溶解性 | Water 2.5 mg/mL DMSO |
| 储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
Sulfo-SMCC sodium 是一种常用的异双官能交联剂，是不可降解的 ADC linker，其带有N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯和马来酰亚胺基团，分别与伯胺和巯基反应。NHS酯与pH 7〜9的伯胺反应形成酰胺键，而马来酰亚胺与pH 6.5〜7.5的巯基反应形成稳定的硫醚键。在水溶液中，NHS酯的水解降解是竞争性反应，其速率随pH的增加而增加。马来酰亚胺基团比NHS-酯基团稳定，但在pH值> 7.5时会缓慢水解并失去其对巯基的反应特异性。Sulfo-SMCC可溶于水和许多其他水性缓冲液，约10 mM。
Sulfo-SMCC 常用于制备抗体-酶偶联物或者半抗原的制备。一般推荐两步法操作，第一步过量的Sulfo-SMCC先和含有氨基的蛋白进行反应，通过脱盐柱或者透析方式去除未反应的Sulfo-SMCC，第二步把含有巯基的蛋白与修饰后氨基蛋白进行连接反应。
注意事项
• Sulfo-SMCC 极易受潮。打开瓶盖使用前必须平衡至室温，避免试剂受潮而失效。试剂保证现用现配，剩余的试剂应当丢弃，不得倒回原瓶中。
• Sulfo-SMCC在水中的溶解浓度约为10mM, 随着溶液中盐浓度的增加而减少。最好用去离子水配置母液，一旦Sulfo-SMCC溶解可以用PBS或其他无氨基溶液稀释。
• 在偶联过程中，不能使用含有氨基的缓冲液（如Tris或者 glycine) ，或者含有巯基的缓冲液。如果反应体系中含有相关组分，建议透析到适合的缓冲液中，如PBS缓冲液。
• 与马来酰亚胺（maleimide groups）基团反应的蛋白必须保证含有自由的巯基，如果形成二硫键，需要使用还原剂（如DTT，TCEP等）打断二硫键，还原出自由的巯基。
使用方法
一般推荐交联剂的摩尔数是含有氨基蛋白的10-50倍，以保证充分的活化含有氨基的蛋白。
材料准备
• 偶联液：磷酸盐缓冲液（PBS = 100mM sodium phosphate, 150mM sodium chloride, pH 7.2）或者其他不含氨基或者巯基的缓冲液pH 6.5-7.5。建议添加1-5mM的EDTA，减少二硫键的形成；
• 脱盐柱；
• 需要偶联的目标分子：含有氨基的蛋白和含有巯基的蛋白。
操作流程
1. 使用偶联液溶解含有氨基的蛋白，或者将含有氨基的蛋白透析至偶联液中。
2. 向蛋白溶液中加入合适量的交联剂，交联剂和蛋白安排一定摩尔比进行反应，推荐使用量如下：
当蛋白浓度小于1mg/ml时，交联剂与蛋白的摩尔比为40-80；
当蛋白浓度为1-4mg/ml时，交联剂与蛋白的摩尔比为20；
当蛋白浓度为5-10mg/ml时，交联剂与蛋白的摩尔比为5-10。
3. 混合均匀，室温下孵育反应30分钟，或者4度下孵育反应2小时。
4. 反应结束后，使用脱盐柱去除未反应的交联剂，使用偶联液进行平衡。
5. 将含有巯基的蛋白加入到活化的蛋白溶液中，含有巯基蛋白的加入量根据两个蛋白需要偶联的比例或蛋白上巯基和活泼氨基的数量定。
6. 混合均匀，室温下孵育反应30分钟，或者4度下孵育反应2小时。
7. 反应结束后，完成蛋白的交联实验。
8. 通过SDS-PAGE电泳鉴定两种蛋白的偶联效果。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.2916 mL | 11.4582 mL | 22.9163 mL |
| 5 mM | 0.4583 mL | 2.2916 mL | 4.5833 mL |
| 10 mM | 0.2292 mL | 1.1458 mL | 2.2916 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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