棕榈酸 Palmitic acid是一种常见于动物和植物中的长链饱和脂肪酸。Palmitic acid 可以诱导小鼠颗粒细胞中葡萄糖调节蛋白 78 (GRP78) 和 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 (CHOP) 的表达。棕榈酸钠还可以用于建立细胞脂肪变性模型。
分子量 | 256.42 |
分子式 | C16H32O2 |
CAS号 | 57-10-3 |
中文名称 | 棕榈酸;十六酸;软脂酸 |
溶解性 | Ethanol 12 mg/mL DMSO ≥ 10 mg/mL |
储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年;4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月;-20°C 1个月 |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
棕榈酸 Palmitic acid是一种常见于动物和植物中的长链饱和脂肪酸。
Palmitic acid 细胞实验溶解方案(仅供参考)
参考溶解方案:0.1-0.5% Ethanol + 1% BSA + 98.5-98.9% 基础培养基 (eg: DMEM)。
以配制 1 mL 的浓度为 0.25 mM 工作液为例:
1. Palmitic acid (PA) 母液配制: 1 mg PA 中加入 78 μL 无水乙醇溶解至 50 mM (超声加热 3 min, 37°C);
2. BSA 母液配制: 取适量 BSA 加入基础培养基 (eg: DMEM, 1640 等) 配成 10% BSA 溶液 (100 mg/mL);
3. 稀释:取 5 μL PA母液 (50 mM),加 100 μL BSA 溶液 (10%),混合均匀 (超声加热 3 min, 37°C),加 895 μL 基础培养基 (eg: DMEM,1640 等),混匀 (超声加热 3 min, 37°C);
4. 将工作液经无菌滤膜过滤后可用于细胞处理;
5. 空白组注意做好溶剂对照;
6. 若您需要配制更高工作浓度的工作液,可尝试适当提高 PA 母液浓度,尽量控制乙醇终占比在 0.1-0.5%。
使用棕榈酸(Palmitic acid, PA)进行细胞实验的protocol(仅供参考):
1、细胞内游离胆固醇的标记和定量实验:
细胞铺板:使用96孔底透黑色细胞培养板,Huh7细胞,5 x 10^3 个/孔,放置于37°C培养箱中培养。
药物处理:细胞贴壁24小时后,使用0.5 mM 棕榈酸处理细胞24小时,以诱导细胞内游离胆固醇的增加。同时,使用DMSO和U-18666A(胆固醇合成抑制剂)作为对照组。
固定及染色:使用4%多聚甲醛固定细胞,然后用FilipinIII和HCS NuclearMaskTM Red染色,以标记游离胆固醇和细胞核。
高内涵成像分析:使用Operetta CLS成像分析系统进行图像拍摄和分析,评估不同处理后细胞内游离胆固醇的含量和分布。
2、白藜芦醇通过激活PKA-PLIN2通路促进HepG2细胞脂滴脂解的实验:
细胞培养:使用0.2 mmol/L棕榈酸处理HepG2细胞24小时,建立肝细胞脂肪变性模型。
药物干预:使用不同浓度的白藜芦醇(RSV)或转染PLIN2 siRNA或PKI过表达质粒后,再用40 μmol/L RSV干预24小时。
脂质积累检测:通过Oil Red O染色检测脂滴形成情况,酶法检测细胞内甘油三酯以及细胞外游离甘油含量。
蛋白和mRNA水平检测:使用Western blot检测PLIN2蛋白表达,实时定量PCR检测PLIN2 mRNA表达。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 3.8999 mL | 19.4993 mL | 38.9985 mL |
5 mM | 0.78 mL | 3.8999 mL | 7.7997 mL |
10 mM | 0.39 mL | 1.9499 mL | 3.8999 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。