Mag-Fluo-4 AM
Mag-Fluo-4 AM 是一种Ca2+ 的荧光螯合剂，对钙有很高的亲和性，能特异性识别细胞内钙离子，具有灵敏性高，细胞毒性低等优点。增加 AM乙酰甲酯可以更好的进入细胞，在被细胞内的酯酶剪切后，能滞留在细胞内并与钙离子结合，从而产生较强荧光 (λex=475 nm， λem=515 nm)。
CAS No.：1097709-31-3
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 817.65 |
| 分子式 | C37H33F2NO18 |
| CAS号 | 1097709-31-3 |
| 性状 | Oil |
| 储存条件 | -20°C, protect from light |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
生物活性
Mag-Fluo-4 AM 是一种Ca2+ 的荧光螯合剂，对钙有很高的亲和性，能特异性识别细胞内钙离子，具有灵敏性高，细胞毒性低等优点。增加 AM乙酰甲酯可以更好的进入细胞，在被细胞内的酯酶剪切后，能滞留在细胞内并与钙离子结合，从而产生较强荧光 (λex=475 nm， λem=515 nm)。
使用说明（整理自公开文献，仅供参考）
Mag-Fluo-4 AM储备液配制
使用高质量无水DMSO配制2-5 mM的Mag-Fluo-4 AM储备液。所有未使用的储备液应分装为单次用量，配制后保存于-20°C，避免反复冻融
工作液配制
实验当天，将Mag-Fluo-4 AM溶解于DMSO或解冻储备液至室温。
选择适当缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液），加入0.04% Pluronic F-127 (M3825)，配制2-20 µM Mag-Fluo-4 AM工作液。多数细胞系推荐使用4-5 μM终浓度，具体浓度需根据实验条件优化。
注意事项：
1.Pluronic F-127可提高Mag-Fluo-4 AM的水溶性
2.若细胞存在有机阴离子转运体，可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒（孔内终浓度0.5-1 mM）以减少探针泄漏
操作步骤
1.将细胞在生长培养基中培养过夜
2.次日向细胞板中加入1X Mag-Fluo-4 AM工作液
注：若待测化合物与血清有相互作用，加载前更换为新鲜HHBS缓冲液
3.孵育条件：37°C细胞培养箱中孵育30-60分钟
注：某些细胞系可延长孵育时间至1小时以上以提高信号强度
4.用HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液替换工作液
5.加入刺激剂后，立即使用以下设备检测荧光信号：
配备FITC滤光片的荧光显微镜
荧光酶标仪（如FDSS、FLIPR或FlexStation）检测参数：Ex/Em = 490/525 nm，截止波长515 nm
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.223 mL | 6.1151 mL | 12.2302 mL |
| 5 mM | 0.2446 mL | 1.223 mL | 2.446 mL |
| 10 mM | 0.1223 mL | 0.6115 mL | 1.223 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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参考文献
以上参考文献由AI整理，仅供参考，AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。
