Diphenyl Blue 别名：Direct Blue 14; 台盼蓝
Diphenyl Blue (Direct Blue 14，台盼蓝) 是一种酸性偶氮染料，通常用作区分活细胞和非活细胞的染色剂。它使死亡细胞变成蓝色，活细胞不染色。
CAS No.：72-57-1
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 960.81 |
| 分子式 | C34H24N6Na4O14S4 |
| CAS号 | 72-57-1 |
| 中文名称 | 台盼蓝 |
| 溶解性 | DMSO ≥ 20 mg/mL |
| 储存条件 | 4°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
Diphenyl Blue (Trypan Blue) 是一种细胞活性染料，最常用的死细胞鉴定染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞的存活率。Diphenyl Blue 染色是组织和细胞培养中方法之一。细胞丧失活性或细胞膜不完整时，Diphenyl Blue 可将其染成蓝色，正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥 Diphenyl Blue，细胞不会被染成蓝色。但巨噬细胞能够吞噬 Diphenyl Blue，所以可用于巨噬细胞的活体染色剂。
使用说明（仅供参考）
1. 制备储存液
可以用 0.85% Nacl 配制 0.4% 的台盼蓝。如用100 mL 0.85% Nacl 溶解 400 mg 台盼蓝粉末。
注：台盼蓝储存液建议分装后于 4℃ 避光保存。
2. 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 0.04% 的台盼蓝工作液。
注：请根据实际情况调整 台盼蓝工作液浓度，且现用现配。
3. 细胞染色
3.1 悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
3.2 加入 1 mL 台盼蓝工作液，室温孵育 5 分钟。
3.3 400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃去上清。
3.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
3.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.0408 mL | 5.2039 mL | 10.4079 mL |
| 5 mM | 0.2082 mL | 1.0408 mL | 2.0816 mL |
| 10 mM | 0.1041 mL | 0.5204 mL | 1.0408 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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