D-Glucose (Glucose) 是一种重要的单糖,是生物学中的重要碳水化合物。
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Lymphangiogenesis contributes to exercise-induced physiological cardiac growth
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Environ Health Perspect. 2020 Jun;128(6):67008.
分子量 | 180.16 |
分子式 | C6H12O6 |
CAS号 | 50-99-7 |
中文名称 | 葡萄糖;D-无水葡萄糖 |
溶解性 | Water 50 mg/mL |
储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年;4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月;-20°C 1个月 |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
D-Glucose (Glucose) 葡萄糖(又称右旋糖)是一种单糖,可被人身直接吸收,是人体营养物质和机体能量的主要来源,在人体内能直接参与新陈代谢过程。在消化道中,葡萄糖比任何其他单糖都容易被吸收,而且被吸收后能直接为人体组织利用。用于生物培养基制备。
高糖高脂(葡萄糖、棕榈酸PA)诱导H9C2 心肌细胞损伤模型
大鼠H9C2心肌细胞系复苏后传代2~3次,调整细胞密度为1×105个/mL。
正常对照组(Con)采用葡萄糖浓度5.5mmol/L普通培养液培养;高糖高脂组(HG)采用葡萄糖浓度25.5mmol/L高糖培养液培养,加入棕榈酸(PA)350μmol/L。
检测
1) CCK8检测细胞活力
将细胞接种于96孔板,培养24h后,每孔加入100 uL的无血清的DMEM高糖培养基和10uL的CCK8溶液(这里建议使用10% FBS的高糖培养基,与CCK8试剂以9:1的比例配好工作液后,每个孔加入100 uL CCK8 工作液)。37℃孵育2h,采用酶标仪OD 450nm检测吸光值。
2) TUNEL 检测细胞凋亡率
将爬好细胞的玻片浸入4%的多聚甲醛(pH7.4)溶液中室温固定15min,1X PBS洗涤3次。每个爬片上滴加100 uL浓度为20μg/mL的Proteinase K溶液,室温孵育20min,滴加100 uL 1×Equilibration Buffer,室温孵育15min,加入TdT孵育缓冲液,孵育60min,1X PBS洗涤3次,滴加DAPI避光孵育5min,洗涤、封片、采集图像。
3) Westernblot法检测蛋白表达
六孔板培养细胞,弃上清,1X PBS洗涤细胞后以1%苯甲磺酰氟裂解液冰上裂解30min,提取蛋白样品,4°C 12000r离心5min后取上清,测定蛋白浓度并定量、煮沸变性。电泳、转膜、封闭,加入抗体(Caspase‐3、c‐Caspase‐3、Mst1、p‐Mst1、Nrf2、p62、Beclin1、GAPDH,1:1000),4℃孵育过夜1X TBST洗涤后加入HRP标记二抗,充分洗涤后显色曝光,采用BandScan分析灰度值。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 5.5506 mL | 27.7531 mL | 55.5062 mL |
5 mM | 1.1101 mL | 5.5506 mL | 11.1012 mL |
10 mM | 0.5551 mL | 2.7753 mL | 5.5506 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。