CY5-SE 别名：Cy5 NHS Ester; Sulfo-Cyanine5 Succinimidyl Ester

目录号 M13775

Cy5-SE (Cy5 NHS Ester) 是一种用于标记肽, 蛋白质, 寡核苷酸的氨基基团的反应染料。激发波长 (nm): 649, 发射波长 (nm): 670。

CAS No.：146368-14-1

规格	价格	库存状态
5mg	¥ 1305	现货
10mg	¥ 1962	现货

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质量标准及产品资料

纯度：>99%
COA

化学性质/溶解性/储存

分子量	753.88
CAS号	146368-14-1
溶解性	DMSO 25 mg/mL Water 5 mg/mL
储存条件	-20°C, protect from light, dry, sealed
运输方式	冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

生物活性

Cy5-SE (Cy5 NHS Ester) 是一种用于标记肽, 蛋白质, 寡核苷酸的氨基基团的反应染料。激发波长 (nm): 649, 发射波长 (nm): 670。

使用方法（整理自公开资料，仅供参考）

一、Cy5 NHS ester标记抗体蛋白分子

水溶性Cy5 NHS ester标记 (D-ser2)-leucineenkephalin

1. Cy5 NHS 1.0 mg溶解于400 μL DMSO后，加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine- enkephalinacetate(YSGFLT，0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。（Dye 和peptide 投料比是 1:1）

2. 然后加入15 μL三乙胺，常温避光搅拌反应混合物过夜。

3. 用HPLC 纯化蛋白，使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm)，每次上样注入2×400 μL，30分钟梯度洗脱。从0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O（0.1% TFA）=70∶30，流速4mL /min。（对不同的蛋白选择不同的合适HPLC梯度流动相）

4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5. 产品冷冻干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光储存；必要时可用质谱表征。

6. CyDye标记的蛋白稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4 ℃可避光保存2月；更长期的保存需加入等体积的甘油-20 ℃避光保存。

F/P计算：

Cy5 在650 nm 的摩尔吸光系数为250 000 M-1cm-1 ，所用蛋白在280 nm处的摩尔吸光系数为170000M-1cm-1；Cy5在280nm处的吸收是650nm处的5%。按以下公式计算F/P值。

[Cy5 dye] = (A650)/250 000

[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000

F/P final= [dye]/[peptide]= /{A280 - (0.05×A650)}

二、活体荧光成像实验：

1. SPF级 BALB/C裸鼠，6～8 周龄，18～20克，实验前24 h 自由进食、饮水。

2. 于实验裸鼠腹腔内注射2%戊巴比妥Na300μL(215mg/ kg)麻醉动物。将裸鼠俯卧位平放于小动物多光谱活体成像系统的记录暗箱中。实验时将Cy5或Cy5标记的生物分子或药物溶于水（或甲醇/乙醇/乙二醇，有时DMSO 200uL能把小鼠杀死）稀释后，于裸鼠尾静脉注射200μL（浓度0.5 mg/mL），用量和时间需要客户根据自己的仪器和药物试剂等条件优化。每5min记录1 张动物在体内发射荧光的成像图片，分析荧光药物的分布情况。对照鼠不注射药物，进行同时记录。记录结束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、肾等脏器，进行成像。

实验参考

蛋白/细胞实验

下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

浓度/溶剂体积/质量	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	1.3265 mL	6.6324 mL	13.2647 mL
5 mM	0.2653 mL	1.3265 mL	2.6529 mL
10 mM	0.1326 mL	0.6632 mL	1.3265 mL

*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。

质量		浓度		体积		分子量*
	=		x		x

动物实验

建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。