Collagenase I 别名：胶原酶 I 型
Collagenase I（胶原酶 I 型）又称梭菌肽酶，是从溶组织梭状芽胞杆菌发酵而得的一种蛋白酶。可用于分离上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞。本品为胶原蛋白酶I型。
CAS No.：9001-12-1
Stem Cell Res. 2024 Jun;Volume 77, 103387.
化学性质/溶解性/储存
| CAS号 | 9001-12-1 |
| 中文名称 | 胶原酶 I 型 |
| 溶解性 | Soluble in aqueous buffers |
| 储存条件 | -20°C, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
Collagenase I（胶原酶 I 型）又称梭菌肽酶，英文名Collagenase，是从溶组织梭状芽胞杆菌发酵而得的一种蛋白酶。
本品为胶原酶I型
使用方法：
一、储存液制备
1）直接往100mg胶原酶内加入100µl含钙镁的HBSS缓冲液，轻轻漩涡震荡确保完全溶解混匀。
2）根据具体批次的酶活力，用含钙镁的HBSS缓冲液调整酶浓度到100U/µl（1000×储存液），之后用低蛋白吸附滤膜过滤除菌。
3）立即使用或将储存液根据单次用量分装，置于-20℃避光保存。
4）使用前置于冰上融化，避免反复冻融。建议胶原酶的工作浓度范围50-200U/ml（或0.5-2.5mg/ml），具体使用浓度请根据具体消化对象或参考文献来调整。
二、组织分离
1）用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4mm小片，之后用含钙镁的HBSS缓冲液清洗组织片几次；
2）加足量含钙镁的HBSS缓冲液浸没组织片，之后按照50-200U/ml用量加入适量胶原酶；
3）37℃孵育4-18h，置于水平摇床并且孵育体系加入3mM CaCl2可提高消化效率。
4）将消化好的细胞混合物用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。
5）将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。
6）低速离心，吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞，使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。
三、器官灌注
1）将胶原酶加入37℃预热含钙镁的HBSS缓冲液，使其浓度为50-200U/ml，或根据具体实验体系调整；另加入3mM CaCl2可提高消化效率。
2）按照针对特定器官的预优化频率来进行灌注；
3）将收集到的细胞/组织混合碎片用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。
4）将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。
6）低速离心，吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞，使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。
实验参考
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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