Chymotrypsin 别名：α-Chymotrypsin; 胰凝乳蛋白酶
Chymotrypsin（胰凝乳蛋白酶，α-糜蛋白酶）是从牛或猪胰中提取的一种蛋白分解酶，能促使血凝块、脓性分泌物和坏死组织等的液化消除。水溶液不稳定，宜现用现配。
CAS No.：9004-07-3
化学性质/溶解性/储存
| CAS号 | 9004-07-3 |
| 中文名称 | 胰凝乳蛋白酶；α-糜蛋白酶 |
| 溶解性 | Soluble at 10mg/ml in 1mM HCl DMSO 30 mg/mL |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
α-糜蛋白酶系自牛或猪胰中提取的一种蛋白分解酶，能促使血凝块、脓性分泌物和环死组织等的液化消除，水溶液不稳定，宜新鲜配制。
使用说明（仅供参考）
用 1 mM HCl 配制成 10 mg/mL 浓度，并添加 2 mM 氯化钙作为稳定剂。配制好的溶液可在 4℃ 下保存一周。
蛋白质的制备
1. 溶解及变性：将蛋白质溶解在 100mM Tris-HCl, 10mM CaCl2 (pH 8.0) 中，难以溶解或需要变性才能有效消化的蛋白质可在室温至 37 ℃ 下用最小体积溶解在变性剂（例如 6-8M 尿素或 6 M 盐酸胍）中 1 h，对于某些蛋白质，将样品加热至 60℃ 并保持 15-20 min 可能会更有利于溶解变性；
2. 二硫化物还原：向溶解的蛋白质中添加 DTT 或β-巯基乙醇至终浓度为 5 mM。将该样品在 50-60℃ 下加热 20 min；
3. 烷基化：让还原后的蛋白质混合物冷却至室温，添加碘乙酰胺至终浓度为 15 mM；
4. 最后用 100 mM Tris-HCl, 10mM CaCl2 (pH 8.0) 调节反应体积，使尿素或盐酸胍浓度低于或等于 1 M 。
酶重构
将凝乳蛋白酶溶解在 1 mM HCl 中，推荐最终浓度为 0.5-1 μg/μL。
消化
添加凝乳蛋白酶至最终蛋白酶与蛋白比例为 1：200 至 1：20 (w/w)，并在 25℃ 下孵育样品 2-18 h。也可以通过添加 0.5% 三氟乙酸来终止消化反应。
实验参考
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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参考文献
