AbMole Supersensitive ECL Kit 以化学发光法检测蛋白质,应用于免疫印迹(WB)实验。其原理是用偶联了辣根过氧化物酶(HRP)的抗体直接或间接结合印迹膜上的目标蛋白,加入本试剂盒配制的ECL工作液,ECL随后与HRP发生反应,发出荧光。 AbMole Supersensitive ECL Kit 对化学发光底物和增强剂进行了优化,具有灵敏度高,稳定性好等特点,可使用较高的抗体稀释倍数(1:5000~1:10000),试剂中不含有毒成分,安全性更高。
产品规格
货号 |
名称 |
规格 |
M21605-120ml |
AbMole Supersensitive ECL Kit |
120 ml(A/B液各60 ml) |
M21605-500ml |
AbMole Supersensitive ECL Kit |
500 ml(A/B液各250 ml) |
产品优势
1. 灵敏度高,稳定性好。
2. 信噪比高,条带清晰。
3. 抗猝灭能力强,可重复曝光。
4. 节省抗体,降低成本。
使用说明
1. 进行常规Western Blot实验,按步骤进行SDS-PAGE电泳、转膜、及一抗和二抗孵育。
2. 根据PVDF膜的大小,将适量A液和B液等体积混合制备ECL工作液,室温放置备用。
3. 用镊子小心取出洗好的膜,膜的另一角轻靠吸水纸以沥干膜上洗膜液,将结合有蛋白的一面朝上,放置于洁净保鲜膜上。
4. 将印迹膜置于显影板上,根据膜的大小均匀滴加适量步骤2中配制好的ECL工作液,孵育时确保工作液覆盖整张膜,室温孵育1-2min。
5. 将处理好的印迹膜置于X光片盒中,在暗室中取一张胶片小心置于膜上,曝光时间取决于膜上的发光强度,曝光后立即显影定影,或将印迹膜放置到荧光成像仪内,按仪器说明书进行检测。
注意事项
1. ECL工作液应在每次使用前新鲜配制,避免室温放置时间过长。
2. 在配置ECL工作液过程中吸取A液和B液时应避免交叉污染。
3. 曝光时间过长或蛋白过量,将会导致过曝,使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足则条带模糊。
4. 发光强度会随时间缓慢减弱,建议在两小时内完成实验。
5. ECL发光液是HRP的显色底物,因此检测对象必须由HRP标记。
6. 孵育二抗后,洗膜缓冲液应避免使用NaN3,这是HPR的抑制剂。
7. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗等用途。
保存条件
2-8℃避光保存,1年有效。
说明书下载
Critical Reviews. 2024 Jan;1045.
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