明胶存在于胶原蛋白中,是一种具有高平均分子量的水溶性蛋白质的异质性混合物。它可用于对细胞培养器皿进行包被以改善细胞的附着,加入至PCR以稳定Taq DNA,作为Western blotting、ELISA和免疫化学中的封闭试剂,以及作为细菌学中用于物种分化培养基的组分。
J Environ Chem Eng. 2024 Dec 10.
J Sport Health Sci. 2022 Jul;11(4):466-478.
Lymphangiogenesis contributes to exercise-induced physiological cardiac growth
CAS号 | 9000-70-8 |
中文名称 | 明胶(来源于猪皮) |
溶解性 | Water 67 mg/mL at 50 °C |
储存条件 | RT, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
明胶存在于胶原蛋白中,是一种具有高平均分子量的水溶性蛋白质的异质性混合物。它可用于对细胞培养器皿进行包被以改善细胞的附着,加入至PCR以稳定Taq DNA,作为Western blotting、ELISA和免疫化学中的封闭试剂,以及作为细菌学中用于物种分化培养基的组分。作为一种生物相容性的聚合物,它已被作为递送载体用于活性生物分子的释放以及支架的生成用于组织工程应用。在制药工业中,明胶可用作悬浮和包封剂,以及其他应用。明胶可溶于热水而非冷水。 它几乎不溶于大多数有机溶剂,如醇、氯仿、二硫化碳、四氯化碳、乙醚、苯、丙酮和油。
使用说明
1. 明胶的溶解
1)根据自己需要的明胶浓度,称取适量明胶粉末,加入含双蒸水或者PBS buffer的容器内;
2)明胶经10 min浸泡后,用热水浴法加热搅拌直至完全溶解(温度不要超过70 ℃)。
2. 明胶的灭菌
可使用高压灭菌或者滤膜除菌的方式操作:
1)高压灭菌:将配制好的明胶溶液(常用的浓度0.1%~2.0%之间)装入瓶内,进行高压灭菌 121 ℃,20 min,压力15 psi;
2)滤膜除菌:低浓度的(如0.1%或者0.2%)明胶溶液溶解后可以用0.2 μm滤膜除菌。注:需要多准备几个滤器,因为明胶比较难过滤。
3. 明胶的保存
明胶溶液的稳定性比较高,配制好的溶液2-8 ℃保存,性能可能长期保持不变。注:温度提高,明胶的强度和粘度都会明显降低,性能受到干扰。
4. 包被步骤
仅供参考,具体的使用浓度和使用量依据细胞类型和实验目的而定。
1)用组织培养级别的水(如双蒸水)配制2%(w/v)的明胶溶液;
2)121 ℃高压灭菌20 min,压力15 psi;
3)按照5-10 μL/cm2(或者0.1-0.2 mg/cm2)的使用比例涂布培养皿或培养瓶表面。充分覆盖需要包被表面;
4)放置37 ℃培养箱内,至少2 h使得明胶表面干燥。取出后吸去多余明胶。最好用培养基清洗一遍,然后稍微吹干即可使用。
注意事项
1)明胶溶液高压灭菌,建议根据每次大概用量灭菌。灭完菌后的溶液用去离子水稀释成0.1-1%的明胶溶液按照上述方法稀释包被即可;
2)稀释后的明胶溶液如1%,如果没有用完可放到4 ℃保存。下次使用前,一定要放到室温确保融化,再进行后续的包被。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。