AbMole快速封闭液是新一代的即用型、高效快速Western blot封闭液,封闭时间通常仅需5分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及同类的快速封闭液相比,显影时具有更强的信号、更低的背景值。
AbMole快速封闭液是新一代的即用型、高效快速Western blot封闭液,封闭时间通常仅需5分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及同类的快速封闭液相比,显影时具有更强的信号、更低的背景值。本产品不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应。
使用说明
1) 转膜即将完成前准备:根据膜的大小,在平皿或者其它适当容器中倒入一定体积的AbMole快速封闭液,确保封闭液后续能充分覆盖膜即可;
2) 完成转膜后,快速用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在AbMole快速封闭液中,使封闭液完全浸没膜, 置于水平摇床上振荡孵育5分钟 (封闭时间可根据具体实验情况不同进行优化);
3) 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续Western blot实验。
保存条件
4℃保存,或-20℃长期保存。
常见问题
Q1:背景高:
有可能是抗体使用量过多;膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。
Q2: 信号弱或无信号
确保转膜过程中胶与膜完全接触;确保转印夹层排布正确;可以用丽春红染膜并结合染胶(考马斯亮蓝)后确定条带是否转至膜上或转移过头;洗膜时间不宜过长,加入的去垢剂不宜过强或过多,建议使用 0.05% 的弱去垢剂 Tween-20。
Q3: 膜上多处出现黑点或黑斑
转膜时有气泡或抗体分布不均,抗体与封闭液结合抗体尽量去除气泡,抗体孵育时保持摇动。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。