A-769662
A-769662 是一种AMP激活蛋白激酶，EC50 值为 0.8 μM，A-769662 可通过变构激活AMPK，并抑制AMPK的Thr-172位点的去磷酸化。此外，A-769662 能够抑制脂肪酸合成，IC50 值为 3.2 μM。并且A-769662 还可以诱导细胞自噬、细胞周期停滞。A-769662 还具有抑制26S蛋白酶体的功能。
CAS No.：844499-71-4
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 360.39 |
| 分子式 | C20H12N2O3S |
| CAS号 | 844499-71-4 |
| 溶解性（仅列举部分溶剂） | DMSO 35 mg/mL |
| 储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年；4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月；-20°C 1个月 |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
生物活性
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.7748 mL | 13.8739 mL | 27.7477 mL |
| 5 mM | 0.555 mL | 2.7748 mL | 5.5495 mL |
| 10 mM | 0.2775 mL | 1.3874 mL | 2.7748 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
| 细胞系 | MEF细胞 |
| 方法 | A-769662处理或未处理的MEF细胞的细胞活性如下进行测定：细胞通过胰蛋白酶化采集，并与0.5 mg/mL RNase 和50 μg/mL碘化丙啶在室温下黑暗中进行培育；细胞活性通过流式细胞术使用FACScanto流式细胞分析仪分析，激发激光波长为488 nm，碘化丙啶荧光检测波长为600 nm。为测定细胞周期各阶段的细胞比例，细胞通过胰蛋白酶化采集，通过离心收集，用PBS洗涤，并在80%乙醇中于-20°C固定过夜。随后，将这些固定的细胞离心以除去固定剂，并于黑暗中，室温下，在包含0.5 mg/mL RNase 和50 μg/mL碘化丙啶的PBS中培养20分钟。流式细胞术分析如上进行。G1，S，和G2期的细胞比例使用MODFIT程序测定。细胞培养照片在指示时间使用结合具有20倍物镜的倒置显微镜的相机拍摄。 |
| 浓度 | 300 μM |
| 处理时间 | 24小时 |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
| 动物模型 | Sprague Dawley大鼠 |
| 配制 | A-769662溶解在DMSO中 |
| 剂量 | 30 mg/kg |
| 给药处理 | 腹腔注射给药 |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
延伸阅读 （仅做信息扩展，不作实验参考）
AMP活化蛋白激酶（AMPK）是细胞能量代谢的核心调控枢纽，在ATP水平下降或AMP/ATP比值升高时被激活，进而促进分解代谢、抑制合成代谢以恢复能量稳态。A-769662（AbMole，M3444）是首个被报道可直接激活AMPK的变构调节剂，其作用位点位于AMPK的ADaM（allosteric drug and metabolism）位点，该位点位于激酶α亚基和β亚基的界面[1]。A-769662（CAS No.：844499-71-4）与ADaM位点结合后，通过稳定AMPK的活性构象并促进Thr172位点的磷酸化，实现对AMPK的变构激活，这一过程不依赖于上游激酶LKB1或CaMKKβ的参与[1]。值得注意的是A-769662对AMPK的β1亚基具有选择性偏好，这为研究不同β亚基组合的AMPK复合物功能提供了独特工具。
A-769662（AbMole，M3444）在细胞能量代谢调节中有着重要应用，并且细胞实验层面的数据表明，A-769662的激活效应具有浓度依赖性和底物选择性。在HEK293细胞中，能显著增加AMPK的Thr172磷酸化水平，并促进下游靶蛋白ACC的Ser79磷酸化；A-769662（50 μM）在C2C12肌管细胞中，能增强葡萄糖摄取和脂肪酸氧化，同时抑制mTORC1信号通路[2]。A-769662（25 μM）在HepG2肝细胞中，能降低脂质合成相关基因（如FAS、SREBP-1c）的表达，并促进线粒体生物发生标志物PGC-1α的上调[3]。动物实验中，A-769662（CAS No.：844499-71-4）在小鼠糖尿病模型中通过灌胃给药（30 mg/kg，每日两次）可降低空腹血糖和改善葡萄糖耐量；A-769662在高脂饮食诱导的小鼠肥胖模型中（灌胃给药30 mg/kg，连续4周）可减少肝脏脂质沉积并提高胰岛素敏感性[4]。
参考文献及鸣谢
[1] Cool, B.; Zinker, B.; Chiou, W.; et al. Identification and characterization of a small molecule AMPK activator that treats key components of type 2 diabetes and the metabolic syndrome. Cell Metabolism 2006, 3 (6), 403–416.
[2] Scott, J. W.; van Denderen, B. J.; Jorgensen, S. B.; et al. Thienopyridone drugs are selective activators of AMPK that prevent the development of experimental diabetic kidney disease. Journal of the American Society of Nephrology 2008, 19 (10), 1989–1999.
[3] Zang, M.; Xu, S.; Maitland-Toolan, K. A.; et al. Polyphenols stimulate AMP-activated protein kinase, lower lipids, and inhibit accelerated atherosclerosis in diabetic LDL receptor-deficient mice. Diabetes 2006, 55 (8), 2180–2191.
[4] Göransson, O.; McBride, A.; Hawley, S. A.; et al. Mechanism of action of A-769662, a specific small molecule activator of AMP-activated protein kinase (AMPK). Biochemical Journal 2007, 404 (1), 141–148.
[5] Xiao, B.; Sanders, M. J.; Underwood, E.; et al. Structure of mammalian AMPK and its regulation by ADP. Nature 2011, 472 (7342), 230–233.
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参考文献
以上参考文献由AI整理，仅供参考，AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。
