TMB(3,3′,5,5′-四甲基联苯胺)是一种用于免疫组织化学染色程序的生色底物,同时也是酶联免疫吸附测定(ELISA)的可视化试剂。
别名:BM blue; 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine
3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)是一种用于免疫组织化学染色程序的生色底物,以及用于酶联免疫吸附测定(ELISA)的可视化试剂。TMB作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中,该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物,能在370 或 620-650 nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止, 并能在450 nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素(hemoglobin)和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。
与传统的色原试剂联苯胺、邻联甲苯胺及邻苯二胺等相比较,TMB具有检测灵敏度高、稳定性好等优点,而且使用安全。经动物试验和Ames细菌自动变异性试验结果表明,TMB为非致癌物和非致突变物。目前TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、环境监测等领域。
使用方法推荐
一、储存液的配制,用于细胞培养相关实验:按照溶解性数据溶解,如用于细胞实验,请配制成液体之后用0.22um过滤后再加入细胞。
二、储存液的保存:建议现配现用,液体不是很稳定;也可分装成单次用量,2年稳定。避免反复冻融。DMSO配制储备液-80℃储存,6月有效。
分子量 | 240.34 |
分子式 | C16H20N2 |
CAS号 | 54827-17-7 |
溶解性(25°C) | DMSO: ≥ 10 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, dry, protect from light, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 4.1608 mL | 20.8039 mL | 41.6077 mL |
5 mM | 0.8322 mL | 4.1608 mL | 8.3215 mL |
10 mM | 0.4161 mL | 2.0804 mL | 4.1608 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
[1] Sara Bravaccini, et al. TMB in NSCLC: A Broken Dream?
[2] Alfredo Addeo, et al. TMB or not TMB as a biomarker: That is the question
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