TMB(3,3′,5,5′-四甲基联苯胺)是一种用于免疫组织化学染色程序的生色底物,同时也是酶联免疫吸附测定(ELISA)的可视化试剂。
分子量 | 240.34 |
分子式 | C16H20N2 |
CAS号 | 54827-17-7 |
中文名称 | 3,3′,5,5′-四甲基联苯胺 |
溶解性 | DMSO: ≥ 10 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, dry, protect from light, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)是一种用于免疫组织化学染色程序的生色底物,以及用于酶联免疫吸附测定(ELISA)的可视化试剂。TMB作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中,该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物,能在370 或 620-650 nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止, 并能在450 nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素(hemoglobin)和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。
与传统的色原试剂联苯胺、邻联甲苯胺及邻苯二胺等相比较,TMB具有检测灵敏度高、稳定性好等优点,而且使用安全。经动物试验和Ames细菌自动变异性试验结果表明,TMB为非致癌物和非致突变物。目前TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、环境监测等领域。
使用方法推荐
一、储存液的配制,用于细胞培养相关实验:按照溶解性数据溶解,如用于细胞实验,请配制成液体之后用0.22um过滤后再加入细胞。
二、储存液的保存:建议现配现用,液体不是很稳定;也可分装成单次用量,2年稳定。避免反复冻融。DMSO配制储备液-80℃储存,6月有效。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 4.1608 mL | 20.8039 mL | 41.6077 mL |
5 mM | 0.8322 mL | 4.1608 mL | 8.3215 mL |
10 mM | 0.4161 mL | 2.0804 mL | 4.1608 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。