R-spondin-1/RSPO1是一种能激活Wnt信号传导的分泌蛋白,含有2个FU (furin-like) 重复序列和1个TSP type-1结构域,属于R-spondin家族。蛋白编号:Q2MKA7-1 (R31-A263)。
Patent. CN119639678A 2025 Mar 18.
Patent. CN118879569A 2024 Nov 01.
| 中文名称 | 重组人R-spondin 1/RSPO1蛋白 (HEK293, His) |
| 溶解性(仅列举部分溶剂) | Reconstitute the lyophilized powder in ddH2O or PBS to 100 μg/ml |
| 储存条件 | Stable for up to 12 months at -20°C. Upon reconstitution, the product should be stable for up to 1 week at 4°C or up to 6 months at -20°C. |
| 运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同,具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
R-Spondin-1 (Rspo-1)属于 Wnt 调制器(Rspo)家族。目前,该家族由四个结构相关的分泌性配体(Rspo 1-4)组成,均 含有碱性残基和血栓反应蛋白结构域。R-Spondin-1 是一种分泌的激活蛋白质,含有两个相邻的半胱氨酸呋喃结构 域(aa 34-135),具有一个潜在的 N-糖基化位点,其次是血栓孢素(TSP1)基序(aa 147-207)和富含碱性残基 的区域(aa 211-263)。Rspo-1 表达于发育中的中枢神经系统的某些区域,以及肾上腺、卵巢、睾丸、甲状腺和气 管。Rspo 可以与 Frizzled/LRP6 受体复合物相互作用,以刺激 Wnt/ β -catenin 信号通路。
蛋白序列:DNA 序列编码人 R-spondin 1(Q2MKA7.1)蛋白,带 His 标签在 C 端
分子量:预测分子量为 28 kD,由于糖基化修饰实际条带在 45kD 左右
剂型描述:冻干制剂
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。
一、R-spondin-1(RSPO1)的生物学功能
RSPO1(重组人R-spondin 1/RSPO1蛋白, AbMole,M15009)是经典Wnt信号通路的重要激活剂。它主要通过与富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体(LGR4-6,即 LGR4、LGR5或LGR6)结合来发挥作用。当 RSPO1与LGR4-6结合后,可触发经典Wnt信号通路,促使β-catenin在细胞质中积累并进入细胞核,与转录因子TCF结合,进而增加靶基因的表达。例如,在小鼠诱导多能干细胞(iPSC)实验中发现,给予外源性的RSPO1后,能检测到非磷酸化 β-catenin水平显著升高,同时Lgr5 mRNA的相对表达量也增加,这证实了RSPO1对经典Wnt信号通路的激活,并且提示其在维持相关干细胞微环境及干性方面的作用[1]。除了经典途径,RSPO1在非经典 Wnt 信号通路中也发挥作用。有研究认为它可能通过作为锌指蛋白 RNF43(一种重要的 Wnt 信号通路调节因子)的抑制剂来调控非经典Wnt信号。RNF43能够促进Frizzled受体的泛素化和降解,而 RSPO1可以抑制RNF43的这种作用,使得Frizzled受体能够持续发挥功能,从而参与非经典 Wnt 信号的调节[2]。
二、R-spondin-1(RSPO1)在干细胞生物学与类器官技术中的应用
RSPO1(重组Human R-spondin 1/RSPO1蛋白, AbMole,M15009)通过激活Wnt/β-catenin信号通路,在维持干细胞自我更新、促进组织稳态及类器官构建中发挥着极其重要的作用。在肠道上皮干细胞、胚胎干细胞的研究中发现,添加 RSPO1 能够有效促进这些干细胞的增殖,维持其干性。除此之外,R-spondin-1还可以调节干细胞的定向分化,通过梯度添加RSPO1,促进中内胚层分化(如肝细胞、胰腺前体细胞)[3, 4]。
图 1. RSPO1促进胰腺前体细胞的分化和再生[3]
1. R-spondin-1(RSPO1)用于肠道类器官的培养
RSPO1(Recombinant Human R-spondin 1/RSPO1, AbMole,M15009)是多种类器官培养体系的核心组分。在经典肠道类器官培养基中,RSPO1与Wnt3a 、Noggin 和EGF共同模拟肠道干细胞微环境的关键信号。研究表明,添加重组RSPO1能够激活经典 Wnt 信号通路,促使肠道干细胞大量增殖,显著提高肠道类器官的形成效率和生长速度[5]。在一项实验中,将小鼠肠道隐窝分离出来进行体外培养,在含有重组人 RSPO1 的培养基中,肠道隐窝能够迅速增殖并形成结构完整的肠道类器官,类器官内包含肠上皮细胞、杯状细胞、潘氏细胞等多种细胞类型,并且能够长期维持稳定的生长和分化状态。而在缺乏重组RSPO1的对照组中,肠道隐窝的增殖能力明显受限,难以形成成熟的类器官结构[6]。进一步研究发现,重组人 RSPO1 通过与肠道干细胞表面的 LGR4-6受体结合,抑制 RNF43 对 Frizzled 受体的泛素化降解,从而持续激活Wnt信号,为肠道干细胞提供了必要的生存和增殖信号,维持了肠道类器官中干细胞微环境的稳定[6]。这种体外培养技术的突破极大推动了组织发育、疾病建模和药物筛选等领域的发展。

图 2. RSPO1用于肠道类器官的培养[6]
2. R-spondin-1(RSPO1)用于肝脏类器官的培养
对于肝脏类器官的培养,重组RSPO1蛋白(Recombinant Human R-spondin 1/RSPO1, AbMole,M15009)同样具有重要作用。在肝脏发育过程中,肝祖细胞的增殖和分化受到多种信号通路的精细调控。重组RSPO1可以通过激活Wnt信号通路,促进肝祖细胞向成熟肝细胞分化,提高肝脏类器官中功能性肝细胞的比例。实验表明,在诱导多能干细胞向肝脏类器官分化的过程中,添加重组RSPO1能够显著上调肝细胞特异性标志物如白蛋白(Albumin)、细胞色素 P450 家族成员等的表达水平,同时增强肝脏类器官的代谢功能,如对化合物的代谢能力和解毒能力。这是因为重组RSPO1(R-spondin-1)蛋白激活的 Wnt 信号通路可以调节一系列与肝脏发育和功能相关基因的表达,促进促进肝祖细胞向肝细胞分化,进而提高肝脏类器官的质量和功能完整性,为研究肝脏疾病发病机制、化合物肝毒性测试等提供更有效的体外模型。2014年,AbMole的两款抑制剂分别被西班牙国家心血管研究中心和美国哥伦比亚大学用于动物体内实验,相关科研成果发表于顶刊 Nature 和 Nature Medicine。
3. R-spondin-1(RSPO1)用于毛囊类器官的培养
在毛囊类器官研究方面,重组 RSPO1 蛋白(Recombinant Human R-spondin 1/RSPO1, AbMole,M15009)对毛囊类器官的发育和成熟具有显著的促进作用。毛囊类器官是由表皮干细胞和真皮间充质干细胞在特定三维环境中共同培养形成的,能够模拟毛囊在体内的生长和发育过程。研究发现,在毛囊类器官培养体系中加入重组R-spondin-1蛋白后,毛囊类器官的发芽率显著提高,可从原本的 62.7% 提升至 90.0%。在显微镜下观察,经重组人 RSPO1 处理的毛囊类器官形态更加规则,并且长出了类似头发的结构,而未处理组则无明显变化。深入研究其机制发现,重组RSPO1(R-spondin-1)蛋白通过激活 Wnt信号通路,同时上调与毛囊再生相关的基因和蛋白的表达,如碱性磷酸酶(ALP)、Versican 和 β-catenin 等,还能够激活PI3K-Akt、Rap1、NF-κB 等多个与毛囊形态发生和发芽密切相关的信号通路,全方位促进毛囊类器官的发育和成熟,为脱发等毛发相关疾病的研究提供了新的思路和实验基础[7]。
4. R-spondin-1(RSPO1)用于其它类器官的培养
除了上述常见的类器官类型,在胰腺类器官、肺类器官等的研究中,重组RSPO1也逐渐显示出重要作用。在胰腺类器官培养中,重组 RSPO1有助于维持胰腺祖细胞的干性,促进其增殖和分化为胰岛细胞等功能细胞,对于研究胰腺发育具有潜在价值[8]。在肺类器官培养过程中,添加重组RSPO1能够调节肺干细胞的增殖和分化,促进肺类器官形成更接近体内结构和功能的肺泡等结构,为肺部疾病的研究和相关药敏筛选提供了更便捷的模型[8]。
参考文献及鸣谢
[1] 陈晨, 李筠, 刘云章, et al., R-spondin:一个新的Wnt信号通路相关蛋白家族的研究进展, 23(4) (2011) 9.
[2] P. H. Chen, X. Chen, Z. Lin, et al., The structural basis of R-spondin recognition by LGR5 and RNF43, Genes & development 27(12) (2013) 1345-50.
[3] Serena Silvano, Tiziana Napolitano, Magali Plaisant, et al., RSPO1, a potent inducer of pancreatic β cell neogenesis, Cell Reports Medicine 6(5) (2025) 102126.
[4] P. Bhanja, S. Saha, R. Kabarriti, et al., Protective role of R-spondin1, an intestinal stem cell growth factor, against radiation-induced gastrointestinal syndrome in mice, PloS one 4(11) (2009) e8014.
[5] 强龙征, 毛海光, 王梦婷, et al., 肠道类器官在肠疾病机制研究中的运用, (002) (2024) 051.
[6] Toshiro Sato, Robert G. Vries, Hugo J. Snippert, et al., Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche, 459(7244) (2009) 262-265.
[7] E. L. Weber, Y. C. Lai, M. Lei, et al., Human Fetal Scalp Dermal Papilla Enriched Genes and the Role of R-Spondin-1 in the Restoration of Hair Neogenesis in Adult Mouse Cells, Frontiers in cell and developmental biology 8 (2020) 583434.
[8] M. Dossena, R. Piras, A. Cherubini, et al., Standardized GMP-compliant scalable production of human pancreas organoids, Stem cell research & therapy 11(1) (2020) 94.
以上参考文献由AI整理,仅供参考,AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。