Polyethylenimine Linear(PEI)溶液是由一种阳离子聚合物转染试剂,分子量25000,它能与核酸形成复合物,并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性 PEI 转染试剂广泛适。该试剂可在含血清与抗生素的完全培养基中发挥作用,即使在有血清存在的情况下,它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单,对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系,如 HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、 COS-1、COS-7、NIH/3T3 和 Sf9 等),并且细胞毒性较低。
分子量 | 25000 |
分子式 | (CH2CH2NH)N |
CAS号 | 26913-06-4 |
性状 | Liquid |
中文名称 | PEI转染试剂;线性化聚乙烯亚胺 |
储存条件 | -20℃ for up to 6 months |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
Polyethylenimine Linear(PEI)溶液是由一种阳离子聚合物转染试剂,分子量 25000,它能与核酸形成复合物,并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性 PEI 转染试剂广泛适。该试剂可在含血清与抗生素的完全培养基中发挥作用,即使在有血清存在的情况下,它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单,对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系,如 HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、 COS-1、COS-7、NIH/3T3 和 Sf9 等),并且细胞毒性较低。
使用说明(以 6 孔板为例,仅供参考)
1. 细胞铺板
提前一天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在 70%~80%为宜。
2. 转染过程
1)在转染前 2h,移除细胞上原有的培养基,换为新鲜的完全培养基。
2)将 2ug 质粒 DNA 用 50uL 无血清稀释液稀释,充分混匀制成 DNA 稀释液。注意:无血清稀释液建议采用 Opti-MEM 或 ddH2O。
3)向 DNA 稀释液中直接加入 4uL 转染试剂,室温静置 10~15min。转染复合物配制完成。
4)将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀。
5)继续培养 24-48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。
6)使用本产品转染后一般在 24h 开始进入表达高峰期,36-48h 达到表达高峰,相对于脂质体转染试刘,达到峰值的时间延后约 6-12h。
不同细胞培养容器转染用量:
注意事项:
本产品对细胞非常温和,一般情况下转染后无需进行换液操作。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 0.04 mL | 0.2 mL | 0.4 mL |
5 mM | 0.008 mL | 0.04 mL | 0.08 mL |
10 mM | 0.004 mL | 0.02 mL | 0.04 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。