Biotin LC hydrazide(biotinamido hexanoyl hydrazide,生物素LC酰肼)是一种能产生生物素化标记的化合物。同时也可以非放射性的标记白细胞表面糖蛋白,并能保留CD3和CD26等的免疫原性,能用于双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western Blot)等实验。
分子量 | 371.5 |
分子式 | C16H29N5O3S |
CAS号 | 109276-34-8 |
中文名称 | 生物素LC酰肼 |
溶解性 | DMSO 25 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
Biotin LC hydrazide is a long chain protein modification reagent, which can transform periodate-oxidized glycoproteins.
生物素标记特异性抗体的制备
免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能与糖基结合的Biotin-hydrazide作生物素标记。
(1)将纯化的抗体(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在标记缓冲液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5, 0.1Mol/L NaCl)中4℃透析过夜。
(2)吸取0.5ml至微量离心管中,加过碘酸钠溶液至终浓度为10mMol/L,置冰浴上于暗处孵育30min,使抗体分子上的糖基氧化。
(3)将氧化的抗体过PBS平衡的Sephadex G25 PD-10预装柱,使之与过碘酸钠分开。收集蛋白峰。
(4)向抗体管中加入Biotin-LC-hydrazide至终浓度5mMol/L,置混摇器上室温孵育1~2h。
(5)用含0.02%NaN3的PBS平衡Sephadex G25预装柱,将生物素标记的抗体分子过柱与游离的生物素分开。收集蛋白峰,保存-20℃。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 2.6918 mL | 13.459 mL | 26.9179 mL |
5 mM | 0.5384 mL | 2.6918 mL | 5.3836 mL |
10 mM | 0.2692 mL | 1.3459 mL | 2.6918 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。