PKH-26 可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光 (Ex/Em=551/567nm),主要用于对外泌体(Exosome)进行体外荧光标记示踪,细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。
别名:PKH26
PKH-26 可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光 (Ex/Em=551/567nm),主要用于对外泌体(Exosome)进行体外荧光标记示踪,细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。PKH-26荧光处于黄-橙色光谱区间(见下图),最大激发波长为551nm,最大发射波长是567nm,与罗丹明或PE检测系统兼容。相比于PKH-67,PKH-26(red)具有更长的半衰期,标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。
经PKH26标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。
在细胞分裂增殖过程中,PKH26的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH26标记细胞的荧光非常均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,PKH26标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。PKH26可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测,PKH26还可以用于细胞的体外盒体内示踪,标记后荧光在胞内表达稳定,阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况;或将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
PKH26标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH26毒性较小,不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单,且不用放射性同位素,不存在安全隐患。可以更快速,更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH26标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。 PKH26标记细胞呈橙红色荧光,荧光波长:λex=551 nm, λem=567 nm。
PKH26使用案例
图片描述:巨噬细胞(106个/mL)经PKH26(使用浓度:4uL/mL,5min)标记,荧光显微镜(Ex/Em=551nm/567nm)检测。
图片描述:斑马鱼体内给PKH26标记以及荧光成像。
分子量 | 961.32 |
分子式 | C59H97IN2 |
CAS号 | 154214-55-8 |
溶解性(25°C) | Ethanol |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, sealed, stable for 6-12 months |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
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1 mM | 1.0402 mL | 5.2012 mL | 10.4024 mL |
5 mM | 0.208 mL | 1.0402 mL | 2.0805 mL |
10 mM | 0.104 mL | 0.5201 mL | 1.0402 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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