PKH-26 可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光 (Ex/Em=551/567nm),主要用于对外泌体(Exosome)进行体外荧光标记示踪,细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。
分子量 | 961.32 |
分子式 | C59H97IN2 |
CAS号 | 154214-55-8 |
中文名称 | 外泌体示踪染料(红色荧光) |
溶解性 | Ethanol |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, sealed, stable for 6-12 months |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
PKH-26 可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光 (Ex/Em=551/567nm),主要用于对外泌体(Exosome)进行体外荧光标记示踪,细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。PKH-26荧光处于黄-橙色光谱区间(见下图),最大激发波长为551nm,最大发射波长是567nm,与罗丹明或PE检测系统兼容。相比于PKH-67,PKH-26(red)具有更长的半衰期,标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。
经PKH26标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。
在细胞分裂增殖过程中,PKH26的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH26标记细胞的荧光非常均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,PKH26标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。PKH26可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测,PKH26还可以用于细胞的体外盒体内示踪,标记后荧光在胞内表达稳定,阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况;或将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
PKH26标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH26毒性较小,不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单,且不用放射性同位素,不存在安全隐患。可以更快速,更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH26标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。 PKH26标记细胞呈橙红色荧光,荧光波长:λex=551 nm, λem=567 nm。
PKH26使用案例
图片描述:巨噬细胞(106个/mL)经PKH26(使用浓度:4uL/mL,5min)标记,荧光显微镜(Ex/Em=551nm/567nm)检测。
图片描述:斑马鱼体内给PKH26标记以及荧光成像。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.0402 mL | 5.2012 mL | 10.4024 mL |
5 mM | 0.208 mL | 1.0402 mL | 2.0805 mL |
10 mM | 0.104 mL | 0.5201 mL | 1.0402 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。