Pirfenidone 别名：AMR69; S-7701; 吡非尼酮
Pirfenidone（吡非尼酮）是一种高效的抗纤维化剂，Pirfenidone可通过多种机制抑制纤维化进程，包括减少多种促纤维化因子的表达（PDGF、CTGF等）、抑制成纤维细胞增殖和CCL2和CCL12的产生、减少细胞外基质的合成和聚集。此外，Pirfenidone还具有抗氧化和抗炎的作用。
CAS No.：53179-13-8
Int J Med Sci. 2020 Jul 2;17(12):1692-1703.
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 185.22 |
| 分子式 | C12H11NO |
| CAS号 | 53179-13-8 |
| 中文名称 | 吡非尼酮 |
| 溶解性（仅列举部分溶剂） | DMSO 60 mg/mL Water 10 mg/mL (Need ultrasonic) |
| 储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年；4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月；-20°C 1个月 |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
生物活性
Pirfenidone (AMR69) 是一种抗纤维化剂，可减弱纤维细胞中 CCL2 和 CCL12 的产生。Pirfenidone抑制TGF-β产生和TGF-β刺激的胶原蛋白产生，且降低TNF-α和IL-1β产量，具有抗纤维化和抗炎特性。Pirfenidone (< 300 μg/mL)在RAW264.7细胞中通过翻译机制抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α (TNF-α), 这个过程与促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) 2, p38MAP激酶以及c-Jun N-末端激酶 (JNK)的激活无关。Pirfenidone (<10mM)导致LN-18, T98G, LNT-229和LN-308细胞系中胶质瘤细胞密度降低并具有浓度依赖特性。Pirfenidone (< 5 mM)在CCL-64细胞中通过影响TGF-β2 mRNA的表达和pro-TGF-β过程来降低TGF-β生物活性。
一、细胞实验应用
Pirfenidone (50 µM，提前 30 min 预处理，与 TGF-β1 共孵育至实验结束) 对人肺泡 II 型上皮细胞 A549 和人正常肺成纤维细胞 MRC5 具有抗纤维化作用，可抑制 TGF-β1 诱导的 MUC1-CT 磷酸化、β-catenin 激活及 SMAD 结合元件 (SBE) 激活，抑制上皮-间质转化 (EMT) 和成纤维细胞-肌成纤维细胞转化，并抑制成纤维细胞增殖和细胞衰老。
Pirfenidone (100、500、1000 µg/ml，处理 48 h) 对人肺泡上皮细胞 A549 可显著抑制 TGF-β1 诱导的 I 型胶原和 HSP47 过表达，并抑制间质标志物纤连蛋白 (fibronectin) 的过表达，部分恢复上皮标志物 E-cadherin 表达，部分逆转 EMT 过程。
Pirfenidone (0.3、1.0 mg/ml，处理 4 h 后加 TGF-β1 刺激 30 min) 对人心脏成纤维细胞可影响细胞增殖和细胞周期活性，用于研究 TGF-β1 信号通路。
Pirfenidone (1.5 g/L，处理) 对新生大鼠心脏成纤维细胞可增加 miRNA-425-5p 表达，降低 TGF-β1 mRNA 表达。
Pirfenidone (1.85 µg/mL，处理 48 h) 对人胎儿肺成纤维细胞 (HFL1) 可抑制 TGF-β1 诱导的纤维化标志物表达。
二、动物实验应用（小鼠）
Pirfenidone (100、300、600 mg/kg；饲料添加；4 周或 14 周) 对 CCl4 诱导的肝纤维化 B6C3F1/J 小鼠，300 和 600 mg/kg 剂量可显著减少肝脏胶原沉积，降低血清转氨酶水平，防止肝细胞气球样变性；在亚慢性 14 周研究中，300 mg/kg 可显著减少胶原沉积但对炎症标志物影响较小。
Pirfenidone (125 mg/kg；腹腔注射；每日一次，持续 2 周) 对刀豆蛋白 A (ConA) 诱导的免疫性肝纤维化小鼠，可显著降低 II 型和 IV 型胶原、α-SMA 表达及羟脯氨酸含量，降低血清 TGF-β、TNF-α 和 TIMP-1 水平，增加 MMP-2 表达。
Pirfenidone (200、300 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 21 天) 对博来霉素 (BLM) 诱导的肺纤维化 C57BL/6 小鼠，200 mg/kg 可减少 Ashcroft 纤维化评分、BALF 中炎症细胞数和羟脯氨酸含量；300 mg/kg 可显著降低纤维化评分、炎症评分、肺组织 ROS 生成及血液和 BALF 中 MDA 水平。
Pirfenidone (300 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 21 天) 对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠，作为阳性对照可显著改善呼吸功能、肺组织形态和结构、炎症浸润及胶原沉积，减少纤维化蛋白表达。
Pirfenidone (400 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 4 周) 对压力超负荷诱导的心力衰竭 C57BL/6J 小鼠，可减少 HSP47 阳性细胞和肌成纤维细胞，改善左心室收缩功能，减少纤维化面积及 TNF-α、COL1、TGF-β1 表达。
Pirfenidone (0.5%；饲料添加) 对博来霉素诱导的肺纤维化金黄地鼠，可减少肺纤维化、胶原沉积和纤维化标志物表达，降低氧化应激标志物，改善肺功能（肺顺应性、总肺容量、肺活量等）。
三、动物实验应用（大鼠）
Pirfenidone (100 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 28 天) 对博来霉素诱导的肺纤维化 SD 大鼠，可减少体重下降、肺水肿、Ashcroft 纤维化评分及羟脯氨酸含量，增加 SOD 活性。
Pirfenidone (50 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 14–28 天) 对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠，可减少肺重量、羟脯氨酸含量及 BALF 中中性粒细胞和白细胞数量。
Pirfenidone (500 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 12 周) 对 5/6 肾切除 SD 大鼠，可显著改善蛋白尿和 NAG 活性，减轻间质纤维化，降低 TGF-β1、CTGF、α-SMA、纤连蛋白等纤维化标志物表达，抑制 M1 和 M2 型巨噬细胞浸润。
Pirfenidone (0.6–0.9% 或 1%；饲料添加) 对 5/6 肾切除或输尿管梗阻大鼠，可减少胶原积累、纤维化标志物表达，改善肾功能。
Pirfenidone (200 mg/kg；饮水给药；持续 4 周) 对链脲佐菌素 (STZ) 诱导的糖尿病 Wistar 大鼠，可逆转心脏和肾脏纤维化，减少血管周围和间质胶原沉积，降低心脏、肾脏和血浆纤连蛋白浓度，改善舒张期僵硬度。
Pirfenidone (0.3 g/kg；灌胃；每日一次，持续 4 周) 对心肌梗死 SD 大鼠，可降低 LVESd 和 LVEDd，提高 LVEF 和 FS%，减轻心肌纤维化，降低 IL-6、COL1α2、COL3α1 水平，下调 TGF-β1/Smad 通路蛋白表达，上调 miRNA-425-5p。
Pirfenidone (50、100、200 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 14 天) 对急性心肌梗死 SD 大鼠，可剂量依赖性降低左心室质量指数、血清 TNF-α、IL-6 和 TGF-β1 水平，减少心肌 TGF-β1 和 p-Smad/Smad 表达，减轻病理损伤和纤维化程度。
Pirfenidone (1.2%；饲料添加；持续 4 周) 对心肌梗死 Sprague-Dawley 大鼠（缺血再灌注模型），可减少梗死面积约 50%，减少左心室纤维化，保留心脏功能（左心室射血分数），降低室性心律失常易感性。
Pirfenidone (250–300 mg/kg；饲料添加；持续 2 周) 对 DOCA-盐高血压 Wistar 大鼠，可减少心脏纤维化，改善左心室功能，使胶原沉积和舒张期僵硬度正常化。
Pirfenidone (200 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 3 周) 对 CCl4 或胆管结扎诱导的肝硬化 Wistar 大鼠，可降低 I、III、IV 型胶原、TGF-β、Smad-7、TIMP-1 和 PAI-1 基因表达，减少肝星状细胞活化，降低血管周围和间质胶原，改善舒张期僵硬度。
Pirfenidone (500 mg/kg；灌胃；每日一次，持续 3 周) 对 CCl4 和胆管结扎诱导的肝硬化 Wistar 大鼠，可降低 I、III 型胶原和 α-SMA 的 mRNA 和蛋白水平。
四、动物实验应用（其他物种）
Pirfenidone (0.5%；饲料添加) 对博来霉素诱导的肺纤维化金黄地鼠，可减少肺胶原含量、脯氨酰羟化酶活性和胶原 mRNA 表达，降低氧化应激标志物（脂质过氧化、SOD、MPO、MDA），改善肺功能指标。
Pirfenidone (2400 mg；口服；每日三次) 对心动过速起搏诱导的心力衰竭犬，可减少左心房纤维化约 50%，降低左心房传导异质性和心房颤动易感性。
以上内容参考文献如下：
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实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 5.399 mL | 26.9949 mL | 53.9898 mL |
| 5 mM | 1.0798 mL | 5.399 mL | 10.798 mL |
| 10 mM | 0.5399 mL | 2.6995 mL | 5.399 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
| 细胞系 | Primary human cancer-associated fibroblasts (CAFs), NSCLC cell lines (A549, H157, H2122, H358, H1299, H23, PC9) |
| 方法 | 3 × 105 CAF cells/well were seeded in 6-well culture plates in RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal bovine serum and penicillin-streptomycin. After 24 h of adherence, cells were treated with pirfenidone or equal volume vehicle control for 48 h. Pirfenidone powder was purchased from TCI America and dissolved in DMSO to prepare stock solution before dilution into complete culture medium. |
| 浓度 | 1.5 mg/mL |
| 处理时间 | 48 h |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
| 动物模型 | 6-week-old male C57BL/6 mice with bleomycin-induced pulmonary fibrosis |
| 配制 | Pirfenidone tablets (Pirfenex, Cipla Ltd) were ground into fine powder and suspended in freshly prepared 1% carboxymethyl cellulose (CMC) aqueous solution at 60 °C, kept refrigerated at 4 °C before gavage administration. |
| 剂量 | 300 mg/kg body weight per day |
| 给药处理 | Mice received oral gavage administration of pirfenidone solution once daily for consecutive 5 weeks; control mice were given equivalent volume of 1% CMC vehicle at the same time point every day. |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
延伸阅读 （仅做信息扩展，不作实验参考）
Pirfenidone（AMR69，AbMole，M2328） 是一种抗纤维化剂，其机制涉及对TGF-β信号通路的调控。TGF-β1作为肺纤维化进程中的核心促纤维化因子，能通过 SMAD3通路及非经典ERK1/2通路诱导多种纤维化相关基因的转录激活。研究表明，Pirfenidone并不直接抑制TGF-β1诱导的SMAD3或ERK1/2磷酸化，而是通过干预MUC1-CT（MUC1 C末端胞质尾区）的磷酸化过程，阻断TGF-β1诱导的MUC1-CT Thr41及Tyr46位点磷酸化，进而抑制β-catenin的活化及核转位。这一机制有效阻止了磷酸化SMAD3/MUC1-CT/活化β-catenin转录复合物的形成及其对SMAD结合元件（SBE）的激活，从而在转录水平抑制促纤维化基因的表达。Pirfenidone还能通过抑制HSP47（一种胶原蛋白相关的分子伴侣）来抑制纤维化。
在细胞实验层面，Pirfenidone（AMR69，AbMole，M2328）的抗纤维化效应已在多种肺细胞模型中得到验证。在肺泡II型上皮细胞（A549）及肺成纤维细胞（MRC5）中，Pirfenidone能够有效抑制TGF-β1诱导的上皮-间质转化（EMT）及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化过程。此外，Pirfenidone对TGF-β1 诱导的成纤维细胞增殖及细胞衰老也具有显著抑制作用，这些效应均与其对MUC1-CT/β-catenin信号轴的调控密切相关[1]。值得注意的是，Pirfenidone还具有一定的抗氧化活性，能够清除超氧阴离子（O2•-），减轻氧化应激对肺组织的损伤。在肾纤维化、肝纤维化及心脏纤维化细胞模型中，Pirfenidone同样展现出对TGF-β信号通路的调控作用，提示其抗纤维化机制具有一定的组织普适性。
在动物实验层面，Pirfenidone的应用主要集中于博来霉素（Bleomycin）诱导的大/小鼠肺纤维化模型及其它动物器官纤维化模型。在博来霉素诱导的肺纤维化小鼠模型中，Pirfenidone200–300 mg/kg，灌胃给药，持续3-4周后能够显著降低肺组织中的胶原沉积，减轻肺泡结构的破坏，改善肺功能指标。Pirfenidone（250 mg/kg）在UUO 单侧输尿管梗阻肾纤维化小鼠模型中，通过抑制TGF-β1减缓小鼠肾组织的纤维化程度和肾功能的恶化进程。在心脏纤维化研究中，Pirfenidone（150 mg/kg）可减轻压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化，改善小鼠心脏舒张功能。在四氯化碳诱导慢性肝纤维化小鼠每周 5 次 180 mg/kg Pirfenidone经腹腔注射，可缓解小鼠肝小叶纤维分隔形成，改善肝脏损伤。
范例详解
实验人员使用了AbMole的Pirfenidone（AMR69，AbMole，M2328）作为HSP47的抑制剂，处理共转染 AdBMP9 与 AdTGFβ1 的 C3H10T1/2 间充质干细胞，处理浓度为1000 μg/mL。结果表明Pirfenidone干预后可明显逆转 TGFβ1 联合 BMP9 对成骨分化的促进作用，显著降低细胞碱性磷酸酶活性、减少矿化钙结节生成，同时下调 HSP47 与 I 型胶原、骨桥蛋白、骨钙素的蛋白表达，证实 TGFβ1 通过上调 HSP47 增强 BMP9 介导成骨，而Pirfenidone可通过抑制 HSP47 表达阻断该促成骨效应。
图 1.源自AbMole客户发表文献：Int J Med Sci. 2020 Jul 2;17(12):1692-1703.
参考文献及鸣谢
[1] Pirfenidone anti-fibrotic effects are partially by MUC1-CT inhibition. Cell Death Discov, 2020, 6: 38.
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其他 TGF-beta/Smad 产品
参考文献
以上参考文献由AI整理，仅供参考，AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。
