Phosbind Acrylamide (磷酸盐结合丙烯酰胺) 等同于Phos-tag Acrylamide,包含MnCl2,可用于分离和检测磷酸化和非磷酸化蛋白。最适合做的蛋白大小在30 KDa-130 KDa之间。
分子量 | 594.71 |
分子式 | C33H38N8O3 |
性状 | Oil |
中文名称 | 磷酸盐结合丙烯酰胺 |
溶解性 | DMSO 25 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
Phosbind是一种新型的磷酸盐结合标签和功能分子,在中性pH(生理pH)条件下可以特异性结合磷酸离子。Phosbind是一种双环金属络合物(1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl) amino]propan-2-olato dizinc(II) complex),是一种选择性的磷酸结合标签,在中性pH的水溶液中,其对苯基磷酸酯二价阴离子(PH-OPO32-)的Kd值为25 nM (在Zn2+的情况下)。
Phosbind Acrylamide (磷酸盐结合丙烯酰胺) 提供了一种特异性的电泳过程(锰 (II)- Phosbind SDS-PAGE),可同时对磷酸化蛋白及其对应的非磷酸化形式进行分析。
产品优势和特点:
1. 可识别Ser / Thr / Tyr 的所有磷酸化形式。
2. 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续操作。
3. 可用总抗体而非抗磷酸化蛋白的抗体即可同时检测磷酸化和非磷酸化的蛋白。
4. 在制备SDS-PAGE凝胶时只需在丙烯酰胺溶液中简单加入Phosbind Acrylamide和MnCl2溶液即可。(由于1个Phosbind可结合2个锰离子(Mn2+),在凝胶中加入5.0 mM Phosbind Acrylamide水溶液和10 mM MnCl2溶液。)
(1) 染色
• 适于激酶实验。
• 与常规SDS-PAGE几乎相同的机制。
(2) Western Blotting
• 不需要准备针对磷酸化蛋白的抗体。
• 可用于内源性蛋白的磷酸化分析。
• 不需要放射性同位素标记。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.6815 mL | 8.4075 mL | 16.8149 mL |
5 mM | 0.3363 mL | 1.6815 mL | 3.363 mL |
10 mM | 0.1681 mL | 0.8407 mL | 1.6815 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。