Nile Red 别名：Nile Blue A oxazone; Phenoxazone 9; 尼罗红
Nile Red (尼罗红)是一种荧光染料，可用于脂类及蛋白质等的染色。
CAS No.：7385-67-3
Adv Sci (Weinh). 2025 Feb 07.
Cell Death Discov. 2024 May 1;10(1):207.
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 318.37 |
| 分子式 | C20H18N2O2 |
| CAS号 | 7385-67-3 |
| 中文名称 | 尼罗红 |
| 溶解性 | DMSO ≥ 30 mg/mL |
| 储存条件 | 4°C, protect from light |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
尼罗红 (Nile Red)是一种疏水荧光染料，可用于脂类及蛋白质等的染色。其荧光强烈依赖于其环境的极性，在水中溶解度差，荧光性差，在疏水环境中的颜色发射从深红色到强黄色不等。在对脂质进行荧光染色时，应选择450nm-500nm之间的黄色激发光，其发射光大于528nm。使用时，尼罗红浓度一般为0.25μg/mL-2.0μg/mL。
使用方法
1. 染色液制备
（1）配置储存液：取适量的尼罗红粉末用无水DMSO充分溶解制备10mM储存液，按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，避光保存。
（2）工作液配备：用HHBS或生理缓冲液（pH7）将储存液按1:3000稀释为1×尼罗红工作液，漩涡混匀，应为每个样品准备至少600 μL NR工作液。
【注】：尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整，以上仅供参考。
2. 染色步骤
（1）调整细胞浓度为＞5×104个细胞/毫升。
（2）将待测样品用4% 多聚甲醛固定15分钟，并用1×PBS或蒸馏水洗涤两到三次。（可选）
（3）将细胞与尼罗红工作液于37℃下孵育5-15分钟。
（4）使用1×PBS或蒸馏水适当洗涤后，观察。
（5）荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号，Ex/Em = 552/636 nm。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 3.141 mL | 15.705 mL | 31.41 mL |
| 5 mM | 0.6282 mL | 3.141 mL | 6.282 mL |
| 10 mM | 0.3141 mL | 1.5705 mL | 3.141 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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