Nile Red (尼罗红)是一种荧光染料，可用于脂类及蛋白质等的染色。
别名：Nile Blue A oxazone; Phenoxazone 9
尼罗红 (Nile Red)是一种疏水荧光染料，可用于脂类及蛋白质等的染色。其荧光强烈依赖于其环境的极性，在水中溶解度差，荧光性差，在疏水环境中的颜色发射从深红色到强黄色不等。在对脂质进行荧光染色时，应选择450nm-500nm之间的黄色激发光，其发射光大于528nm。使用时，尼罗红浓度一般为0.25μg/mL-2.0μg/mL。
使用方法
1. 染色液制备
（1）配置储存液：取适量的尼罗红粉末用无水DMSO充分溶解制备10mM储存液，按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，避光保存。
（2）工作液配备：用HHBS或生理缓冲液（pH7）将储存液按1:3000稀释为1×尼罗红工作液，漩涡混匀，应为每个样品准备至少600 μL NR工作液。
【注】：尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整，以上仅供参考。
2. 染色步骤
（1）调整细胞浓度为＞5×104个细胞/毫升。
（2）将待测样品用4% 多聚甲醛固定15分钟，并用1×PBS或蒸馏水洗涤两到三次。（可选）
（3）将细胞与尼罗红工作液于37℃下孵育5-15分钟。
（4）使用1×PBS或蒸馏水适当洗涤后，观察。
（5）荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号，Ex/Em = 552/636 nm。
Cell Death Discov. 2024 May 1;10(1):207.
| 分子量 | 318.37 |
| 分子式 | C20H18N2O2 |
| CAS号 | 7385-67-3 |
| 溶解性（25°C） | DMSO ≥ 30 mg/mL |
| 储存条件 | 4°C, protect from light |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 3.141 mL | 15.705 mL | 31.41 mL |
| 5 mM | 0.6282 mL | 3.141 mL | 6.282 mL |
| 10 mM | 0.3141 mL | 1.5705 mL | 3.141 mL |
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
| 重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
| 体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
| Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
| 动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
| 动物 A的Km系数 |
例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数（3），再除以大鼠的Km系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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