MQAE(荧光氯离子指示剂)是一种以溴离子做配体,紫外激发的新型氯离子荧光探针。MQAE 的荧光强度会随着胞内氯离子浓度升高而降低,可用于检测氯离子活性。
MQAE 是一种荧光氯离子指示剂,它比 36Cl 同位素示踪法和微电极法更灵敏,更有选择性。MQAE 以溴离子做配体,可用于检测氯离子活性。MQAE 的荧光强度会随着胞内氯离子浓度升高而降低。氯离子浓度低于 50 nM 时,MQAE 具有 pH 独立的荧光强度。MQAE 的水溶性和细胞渗透性高,可适用于共聚焦显微镜与流式细胞仪等荧光检测。其荧光波长:Ex/Em=350/460 nm。
MQAE使用说明(仅供参考)
1、制备储存液
1) 将 1 mg MQAE 用 0.3066 mL DMSO 配制 10 mM 储备液。
2) 工作液的配制:使用 Krebs-HEPES 缓冲液 (20 mM HEPES,128 mM NaCl,2.5 mM KCl,2.7 mM CaCl2,1 mM MgCl2,16 mM glucose,pH 7.4) 配制 5-10 μM 的 MQAE 工作液。
注:请根据实际情况调整 MQAE 工作液浓度,现配现用。
2、细胞染色
1) 准备工作
悬浮细胞:离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
2) 加入 1 mL MQAE 工作液,室温孵育 30 分钟。
3) 400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
4) 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
5) 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜进行观察。
分子量 | 326.19 |
分子式 | C14H16BrNO3 |
CAS号 | 162558-52-3 |
溶解性(25°C) | Water 90 mg/mL DMSO ≥ 35 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 3.0657 mL | 15.3285 mL | 30.657 mL |
5 mM | 0.6131 mL | 3.0657 mL | 6.1314 mL |
10 mM | 0.3066 mL | 1.5328 mL | 3.0657 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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