MQAE(荧光氯离子指示剂)是一种以溴离子做配体,紫外激发的新型氯离子荧光探针。MQAE 的荧光强度会随着胞内氯离子浓度升高而降低,可用于检测氯离子活性。
分子量 | 326.19 |
分子式 | C14H16BrNO3 |
CAS号 | 162558-52-3 |
中文名称 | 荧光氯离子指示剂 |
溶解性 | Water 90 mg/mL DMSO ≥ 35 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
MQAE 是一种荧光氯离子指示剂,它比 36Cl 同位素示踪法和微电极法更灵敏,更有选择性。MQAE 以溴离子做配体,可用于检测氯离子活性。MQAE 的荧光强度会随着胞内氯离子浓度升高而降低。氯离子浓度低于 50 nM 时,MQAE 具有 pH 独立的荧光强度。MQAE 的水溶性和细胞渗透性高,可适用于共聚焦显微镜与流式细胞仪等荧光检测。其荧光波长:Ex/Em=350/460 nm。
MQAE使用说明(仅供参考)
1、制备储存液
1) 将 1 mg MQAE 用 0.3066 mL DMSO 配制 10 mM 储备液。
2) 工作液的配制:使用 Krebs-HEPES 缓冲液 (20 mM HEPES,128 mM NaCl,2.5 mM KCl,2.7 mM CaCl2,1 mM MgCl2,16 mM glucose,pH 7.4) 配制 5-10 μM 的 MQAE 工作液。
注:请根据实际情况调整 MQAE 工作液浓度,现配现用。
2、细胞染色
1) 准备工作
悬浮细胞:离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
2) 加入 1 mL MQAE 工作液,室温孵育 30 分钟。
3) 400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
4) 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
5) 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜进行观察。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 3.0657 mL | 15.3285 mL | 30.657 mL |
5 mM | 0.6131 mL | 3.0657 mL | 6.1314 mL |
10 mM | 0.3066 mL | 1.5328 mL | 3.0657 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。