Hoechst 33342(赫斯特荧光染料 33342)是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光,常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
别名:bisBenzimide H 33342; HOE 33342
Hoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。
Hoechst 33342使用方法(仅供参考)
1. 将1 mg/mL的Hoechst 33342用PBS或合适的缓冲液制备成10~50 μM Hoechst33342染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色:
a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
注意事项:
1.Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
J Control Release. 2024 Oct;374:400-414.
An “Iron-phagy” nanoparticle inducing irreversible mitochondrial damages for antitumor therapy
Toxicol Appl Pharmacol. 2024 Sep 24.
J Transl Med. 2023 Aug 12;21(1):540.
Front Oncol. 2023 Mar 29;13:1140256.
Evid Based Complement Alternat Med. 2022 Apr 6;2022:4445293.
PLoS Pathog. 2021 Feb 8;17(2):e1008992.
分子量 | 452.55 |
分子式 | C27H28N6O |
CAS号 | 23491-52-3 |
溶解性(25°C) | DMSO 5 mg/mL (ultrasonic and warming) Water ~1 mg/mL (ultrasonic and warming) |
储存条件 | 4°C, protect from light, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
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1 mM | 2.2097 mL | 11.0485 mL | 22.097 mL |
5 mM | 0.4419 mL | 2.2097 mL | 4.4194 mL |
10 mM | 0.221 mL | 1.1049 mL | 2.2097 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
[2] Lisa C Crowley, et al. Detection of DNA Fragmentation in Apoptotic Cells by TUNEL
[3] Lisa C Crowley, et al. Analyzing Cell Death by Nuclear Staining with Hoechst 33342
[5] Martin Purschke, et al. Phototoxicity of Hoechst 33342 in time-lapse fluorescence microscopy
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