Hoechst 33342是一种DNA蓝色荧光染料。
别名：bisBenzimide H 33342; HOE 33342
Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342，是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。
本Hoechst 33342染色液为即用型，可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
使用说明： 使用前用生理盐水或PBS将Hoechst 33342染色液稀释100倍，即为工作液。
Hoechst 33342使用方法（仅供参考）
1. 将1 mg/mL的Hoechst 33342用PBS或合适的缓冲液制备成10～50 μM Hoechst33342染色液。
2. 固定的细胞或组织染色：
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
a）对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
b）吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
c）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色：
a）细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
b）在 37℃培养细胞 10～20 分钟。
c）用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长460 nm。
Front Oncol. 2023 Mar 29;13:1140256.
Evid Based Complement Alternat Med. 2022 Apr 6;2022:4445293.
Nucleic Acids Res. 2021 Mar 18;49(5):2848-2858.
HuB and HuD repress telomerase activity by dissociating HuR from TERC
J Diabetes Res. 2021 Nov 10;2021:9765119.
An In Vitro Model of Diabetic Retinal Vascular Endothelial Dysfunction and Neuroretinal Degeneration
| 分子量 | 561.93 |
| 分子式 | C27H28N6O·3HCl |
| CAS号 | 23491-52-3 |
| 溶解性（25°C） | Soluble in water |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.7796 mL | 8.8979 mL | 17.7958 mL |
| 5 mM | 0.3559 mL | 1.7796 mL | 3.5592 mL |
| 10 mM | 0.178 mL | 0.8898 mL | 1.7796 mL |
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
| 重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
| 体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
| Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
| 动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
| 动物 A的Km系数 |
例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数（3），再除以大鼠的Km系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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