FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator)  别名:RhoNox-1; 亚铁离子荧光探针

目录号 M21552

FeRhoNox-1 也称为RhoNox-1,是一种活跃的荧光探针,特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+) 。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色(红色)荧光产物 (Absmax= 540nm, FLmax= 575nm) 。FeRhoNox-1具细胞膜渗透性和高选择性,适用于活细胞内Fe2+的检测,倾向定位在高尔基体。

FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator)结构式

 

规格 价格 库存状态
1mg ¥ 1680 现货
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质量标准及产品资料
  • 纯度:>98.5%
  • COA
化学性质/溶解性/储存
分子量 458.55
分子式 C28H30N2O4
中文名称 亚铁离子荧光探针
溶解性 DMSO
储存条件 -20°C, protect from light, dry, sealed
运输方式 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。
生物活性

FeRhoNox-1 也称为RhoNox-1,是一种活跃的荧光探针,特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+) 。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色(红色)荧光产物 (Absmax= 540nm, FLmax= 575nm) 。FeRhoNox-1具细胞膜渗透性和高选择性,适用于活细胞内Fe2+的检测,倾向定位在高尔基体。


使用说明

1、需要准备的材料

1.1 细胞培养级或超纯DMSO【降解的DMSO可能会增加FeRhoNox-1的背景信号】

1.2 合适的清洗和观察缓冲液,比如 PBS (pH 7.4)、HBSS等,不含酚红。


2、探针准备

2.1 从冰箱取出FeRhoNox-1,置于室温回温至少30min,将其置于微量离心机内低速离心。将瓶内的粉末离心到管底后,再开盖。

2.2 往一管FeRhoNox-1(50μg)内加入109μL DMSO,用枪反复吹吸5次或以上,使其完全溶解即得到1mM 浓度的FeRhoNox-1储存液。建议单次用完储存液,若实在用不完,请根据单次用量分装,置于-80℃避光保存。用中性缓冲液来稀释储存液。

2.3 于正式实验前,用HBSS或其他中性缓冲液来稀释1mM FeRhoNox-1储存液到所需工作浓度(比如5μM),工作液需现配现用,尽快用完。【注意:酸性溶液会氧化FeRhoNox-1,严重影响探针的效率】


3、染色步骤

3.1 将细胞与5 μM FeRhoNox-1 在 37°C 下一起孵育 30分钟至 1小时,然后用PBS或者汉克斯平衡盐溶液(HBSS)洗涤两到三次,在荧光显微镜下观察图像或通过流式细胞术分析来确定二价铁的水平。


4、荧光检测

对于荧光激发:通用的绿色激发滤片比如Cy3或四甲基罗丹明(TMR)检测用的滤片。

对于激光激发:532nm或543nm激光器比较适合。发射波长为570nm左右。


注意事项

FeRhoNox-1倾向定位在高尔基体,但也可能检测细胞质池内的Fe2+,目前未有明确评估。

荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

实验参考
蛋白/细胞实验

下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

浓度/溶剂体积/质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1808 mL 10.9039 mL 21.8079 mL
5 mM 0.4362 mL 2.1808 mL 4.3616 mL
10 mM 0.2181 mL 1.0904 mL 2.1808 mL

*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。


质量   浓度   体积   分子量*
 =   x   x 

 

动物实验

建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。


动物实验方案计算器

请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。

mg/kg
uL
该动物实验的总需药量为 mg
工作液终浓度2 mg/mL

1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。






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