ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,且对细胞几乎无毒性。本品为ER-Tracker Green,由绿色荧光染料BODIPY FL和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 504 nm,Em= 511nm。Glibenclamide 是一种 ATP 依赖性 K+ 通道阻滞剂 (Kir6, KATP) 和 CFTR Cl-通道阻滞剂,在内质网中发生结合。ER-Tracker 不适合对固定后细胞进行染色。
分子量 | 783.09 |
分子式 | C37H42BClF2N6O6S |
CAS号 | 730931-46-1 |
溶解性 | DMSO 25 mg/mL |
储存条件 | 4°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,且对细胞几乎无毒性。本品为ER-Tracker Green,由绿色荧光染料BODIPY FL和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 504 nm,Em= 511nm。Glibenclamide 是一种 ATP 依赖性 K+ 通道阻滞剂 (Kir6, KATP) 和 CFTR Cl-通道阻滞剂,在内质网中发生结合。ER-Tracker 不适合对固定后细胞进行染色。
使用说明(仅供参考)
一、储备液的制备
将100 μg ER-Tracker溶解于128 μL DMSO中,得到1 mM的储备液。
注:推荐储备液于 -20℃或 -80℃避光保存,避免反复冻融。
二、ER-Tracker工作液的配制
将储备液用无血清细胞培养基或 PBS 稀释以获得 100 nM-1 μM 的 工作液。
注意:ER-Tracker工作液的浓度请根据实际情况调整。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
三、细胞染色
1) 悬浮细胞 (6孔板)
a. 4℃ 1000g 离心3-5分钟,弃上清。PBS洗涤2次,每次5分钟。细胞密度为1×106/mL。
b. 加入1 mL工作液,室温孵育5-30分钟。
c. 4℃ 400g 离心3-4分钟,弃上清。
d. 用PBS洗涤2次,每次5分钟。
e. 用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2) 贴壁细胞
a. 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
b. 从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
c. 加入100 μL工作液,轻摇使之完全覆盖细胞,室温孵育5-30分钟。
d. 用培养基洗两次,每次5分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。
注:若采用流式细胞仪检测,细胞需重悬后再染色。
AbMole has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.277 mL | 6.385 mL | 12.7699 mL |
5 mM | 0.2554 mL | 1.277 mL | 2.554 mL |
10 mM | 0.1277 mL | 0.6385 mL | 1.277 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。