Elastase (from porcine pancreas)(弹性蛋白酶(来源猪胰腺))是一种丝氨酸蛋白酶,可以水解蛋白质和多肽,同时可用于构建大鼠腹主动脉瘤模型。
CAS号 | 39445-21-1 |
中文名称 | 弹性蛋白酶,来源猪胰腺 |
溶解性 | Soluble in water |
储存条件 | -20°C, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
Elastase (from porcine pancreas)(弹性蛋白酶(来源猪胰腺))是一种丝氨酸蛋白酶,可以水解蛋白质和多肽,同时可用于构建大鼠腹主动脉瘤模型。
消化方案(仅供参考)
1. 将弹性蛋白酶重悬于双蒸水中,最终浓度为 1 mg/mL。重悬的弹性蛋白酶可在 4℃ 下储存约 2 周。
2. 将蛋白重悬于反应缓冲液中(如 50 mM Tris-HCl,pH 8.5-9.5 或其他含 TRIS,pH 4.0-10.0 的反应缓冲液);
3. 将弹性蛋白酶添加到蛋白质溶液中,我们建议使用 1:12 至 1:60 的酶与蛋白质溶液比例;
4. 37℃ 孵育 2-18 个小时;
5. 添加 10% 甲酸或TFA至终浓度 0.5% 或 95℃ 加热 10 min 终止反应。
腹主动脉瘤模型 Abdominal aortic aneurysm/AAA
使用2%异氟烷麻醉小鼠(C57BL6/J,12周龄),并进行水平剖腹手术。将腹主动脉从左肾静脉水平分离至分叉处,并暂时在肾动脉和髂动脉之间结扎。用30号针头进行主动脉切开术,将主动脉放血。通过主动脉切口引入PE-26聚乙烯管,以100 mm Hg向主动脉注入1型猪胰腺弹性蛋白酶(比活性,6U/mg)5分钟。然后修复主动脉切开术,消除结扎,并目测确认血流的恢复。关闭切口,将小鼠置于标准条件下。手术后第14天,用氯胺酮/甲苯噻嗪混合物(分别为100和10 mg/kg)麻醉所有小鼠,并通过颈椎脱臼实施安乐死。当小鼠处于麻醉和生理血压下时,以0.01 mm的分辨率测量外部灌注前和灌注后14天的主动脉直径。与灌注前相比,主动脉直径扩张≥100%定义为AAA。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。