DOTAP是一种阳离子脂质体形成化合物,用于将DNA,RNA和其他带负电荷的分子转染到真核细胞中。
| 分子量 | 698.54 |
| 分子式 | C42H80ClNO4 |
| CAS号 | 132172-61-3 |
| 中文名称 | 1,2-三乙醇胺-3-三甲基丙烷 |
| 溶解性(仅列举部分溶剂) | DMSO ≥ 90 mg/mL |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同,具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.4316 mL | 7.1578 mL | 14.3156 mL |
| 5 mM | 0.2863 mL | 1.4316 mL | 2.8631 mL |
| 10 mM | 0.1432 mL | 0.7158 mL | 1.4316 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。
DOTAP(AbMole,M9810)是一种广泛使用的阳离子脂质体转染载体,能通过静电相互作用与带负电荷的核酸分子(质粒 DNA、siRNA、miRNA 等)相结合,形成稳定且易于被细胞摄取的复合物,有效促进外源核酸进入真核细胞内部并释放,从而实现高效体外基因递送与基因功能操控,是分子生物学与细胞生物学研究中常用的转染工具[1]。DOTAP(CAS No.:132172-61-3)具有转染效率高、细胞毒性低、适用细胞谱广等优势,可在多种贴壁细胞与悬浮细胞中实现稳定转染,为基因过表达、基因沉默、报告基因检测、基因定点编辑等研究提供了工具[2]。在细胞实验中,DOTAP(AbMole,M9810)能够高效包裹不同长度与类型的核酸,形成粒径均一、结构稳定的脂质复合物,通过内吞途径进入细胞后,可帮助核酸逃离内体并进入胞质或细胞核,显著提升外源基因的表达效率或基因沉默效果 [3]。DOTAP 转染体系操作简便、重复性好,无需特殊仪器即可完成,适用于高通量基因筛选、信号通路研究等多种实验场景[4]。在基因功能研究中,DOTAP 能用于基因转染以构建过表达细胞模型、siRNA干扰细胞模型,用于探究目标基因对细胞增殖、迁移、周期、凋亡及分化的影响,也可用于荧光报告系统检测启动子活性、转录因子结合效率及信号通路激活程度。DOTAP(1,2-Dioleoyl-3-trimethylammonium-propane)也常被用于纳米递送系统的基础研究,用于优化载体结构、提升核酸包载率、探究细胞摄取机制与胞内转运路径。
参考文献及鸣谢
[1] Felgner, P. L.; Gadek, T. R.; Holm, M.; et al. Lipofection: a highly efficient, lipid-mediated DNA-transfection procedure. Proceedings of the National Academy of Sciences 1987, 84 (21), 7413-7417.
[2] Kawaura, C.; Ohki, Y.; Takizawa, T.; et al. Cationic liposomes for gene delivery: a review. Journal of Controlled Release 1998, 53 (1-3), 1-10.
[3] Basha, G.; Ogris, M.; Wagner, E. DOTAP-based cationic liposomes for siRNA delivery. Oligonucleotides 2009, 19 (1), 35-45.
[4] Zhang, Y.; Li, Y.; Wang, X.; et al. DOTAP liposome-mediated gene delivery in primary cells: optimization and mechanism. International Journal of Molecular Sciences 2020, 21 (11), 3968.
以上参考文献由AI整理,仅供参考,AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。