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CFSE (CFDA-SE) 5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯

目录号 M5117 所有产品仅供科研使用,严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务  


CFSE (CFDA-SE)(5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯)是一种荧光细胞染料,具有细胞可透过性。CFSE 能与胞内细胞骨架蛋白中的游离胺基反应,最终形成具有荧光的蛋白复合物。该染料进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的染色效果最强。CFSE 可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,可用于细胞增殖的检测。

CFSE (CFDA-SE)结构式

别名:5(6)-CFDA N-succinmidyl ester

规格 价格 库存状态
5mg ¥ 600 中国库存现货
10mg ¥ 1000 中国库存现货
50mg ¥ 3500 中国库存现货
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质量标准及产品资料
生物活性

琥珀酰亚胺酯(CFSE)是一种荧光细胞染料。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。不仅用于细胞增殖的体外实验,也可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地并不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,用流式细胞仪或荧光显微镜在490 nm 激发光处可对其进行分析。CFDA, SE标记后的细胞用于体内观察可以长达数周。因此,CFDA, SE常被用来做活细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。CFDA, SE标记的细胞的激发的发射波长分别为500nm和520nm。

另一个参考的CAS号:150206-15-8


使用说明

1、CFSE 溶液的配制

1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 CFSE。CFSE 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 5-10 μM 的 CFSE 工作液。

注意:请根据实际情况调整 CFSE 工作液浓度,现配现用。

2、细胞染色

2.1 向细胞中加入 1 mL CFSE 工作液,室温孵育 15 分钟。
2.2 400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.3 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.4 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

*上述方法来自公开文献,仅供参考。

使用AbMole产品发表的文献
化学性质
分子量 557.46
分子式 C29H19NO11
CAS号 150347-59-4
溶解性(25°C) DMSO 100 mg/mL
储存条件 4°C, protect from light
运输方式 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。
储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.7939 mL 8.9693 mL 17.9385 mL
5 mM 0.3588 mL 1.7939 mL 3.5877 mL
10 mM 0.1794 mL 0.8969 mL 1.7939 mL
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(参考来源于公开文献
小鼠 大鼠 豚鼠 仓鼠
重量 (kg) 0.02 0.15 1.8 0.4 0.08 10
体表面积 (m2) 0.007 0.025 0.15 0.05 0.02 0.5
Km 系数 3 6 12 8 5 20
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×  动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

参考文献

[1] Iñigo Terrén, et al. Methods Enzymol. CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro

[2] Jiang X, et al. Oncoimmunology. Long-lived pancreatic ductal adenocarcinoma slice cultures enable precise study of the immune microenvironment.

[3] Stempin CC, et al. PLoS Negl Trop Dis. GRAIL and Otubain-1 are Related to T Cell Hyporesponsiveness during Trypanosoma cruzi Infection.

[4] Edwin D Hawkins, et al. Nat Protoc. Measuring lymphocyte proliferation, survival and differentiation using CFSE time-series data

[5] Ben J C Quah, et al. Nat Protoc. Monitoring lymphocyte proliferation in vitro and in vivo with the intracellular fluorescent dye carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester

[6] Wang XQ, et al. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester fluorescent dye for cell labeling.

[7] M E Fuller, et al. Appl Environ Microbiol. Development of a vital fluorescent staining method for monitoring bacterial transport in subsurface environments

[8] Graziano M, et al. Exp Cell Res. The fate of thymocytes labeled in vivo with CFSE.

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