CFSE (CFDA-SE)(5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯)是一种荧光细胞染料,具有细胞可透过性。CFSE 能与胞内细胞骨架蛋白中的游离胺基反应,最终形成具有荧光的蛋白复合物。该染料进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的染色效果最强。CFSE 可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,可用于细胞增殖的检测。
EMBO Mol Med. 2024 Mar 6;024-00051.
Neural Regen Res. 2024 May;19(5):1142-1149.
Bromocriptine protects perilesional spinal cord neurons from lipotoxicity after spinal cord injury
Antibiotics (Basel). 2024 Jun 3;13(6):521.
Cancer Lett. 2023 Jun 22;216278.
Cancer Lett. 2023 Aug 1;568:216278.
Immunology. 2023 May 19.
EPOR activation attenuates colitis via enhancing LC3B‐dependent apoptotic cell clearance
J Nanobiotechnology. 2022 Aug 2;20(1):356.
Laboratory Investigation. 2022 Jul 21.
分子量 | 557.46 |
分子式 | C29H19NO11 |
CAS号 | 150347-59-4 |
中文名称 | 5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯 |
溶解性 | DMSO 80 mg/mL |
储存条件 | 4°C, protect from light |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
CFSE (CFDA-SE) 是一种荧光细胞染料。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。不仅用于细胞增殖的体外实验,也可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地并不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,用流式细胞仪或荧光显微镜在490 nm 激发光处可对其进行分析。CFDA, SE标记后的细胞用于体内观察可以长达数周。因此,CFDA, SE常被用来做活细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。CFDA, SE标记的细胞的激发的发射波长分别为500nm和520nm。
另一个参考的CAS号:150206-15-8
使用说明
1、CFSE 溶液的配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 CFSE。CFSE 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 5-10 μM 的 CFSE 工作液。
注意:请根据实际情况调整 CFSE 工作液浓度,现配现用。
2、细胞染色
2.1 向细胞中加入 1 mL CFSE 工作液,室温孵育 15 分钟。
2.2 400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.3 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.4 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。
*上述方法来自公开文献,仅供参考。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.7939 mL | 8.9693 mL | 17.9385 mL |
5 mM | 0.3588 mL | 1.7939 mL | 3.5877 mL |
10 mM | 0.1794 mL | 0.8969 mL | 1.7939 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。