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CFSE (CFDA-SE) 5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯

目录号 M5117 所有产品仅供科研使用,严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务  


CFSE (CFDA-SE)(5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯)是一种荧光细胞染料,具有细胞可透过性。CFSE 能与胞内细胞骨架蛋白中的游离胺基反应,最终形成具有荧光的蛋白复合物。该染料进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的染色效果最强。CFSE 可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,可用于细胞增殖的检测。

CFSE (CFDA-SE)结构式

别名:5(6)-CFDA N-succinmidyl ester

规格 价格 库存状态
2mg ¥ 250 中国库存现货
5mg ¥ 500 中国库存现货
10mg ¥ 800 中国库存现货
50mg ¥ 2200 中国库存现货
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质量标准及产品资料
  • 纯度: >99.0%
  • COA
生物活性

琥珀酰亚胺酯(CFSE)是一种荧光细胞染料。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。不仅用于细胞增殖的体外实验,也可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地并不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,用流式细胞仪或荧光显微镜在490 nm 激发光处可对其进行分析。CFDA, SE标记后的细胞用于体内观察可以长达数周。因此,CFDA, SE常被用来做活细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。CFDA, SE标记的细胞的激发的发射波长分别为500nm和520nm。

另一个参考的CAS号:150206-15-8


使用说明

1、CFSE 溶液的配制

1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 CFSE。CFSE 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 5-10 μM 的 CFSE 工作液。

注意:请根据实际情况调整 CFSE 工作液浓度,现配现用。

2、细胞染色

2.1 向细胞中加入 1 mL CFSE 工作液,室温孵育 15 分钟。
2.2 400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.3 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.4 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

*上述方法来自公开文献,仅供参考。

使用AbMole产品发表的文献
化学性质
分子量 557.46
分子式 C29H19NO11
CAS号 150347-59-4
溶解性(25°C) DMSO 80 mg/mL
储存条件 4°C, protect from light
运输方式 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。
储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.7939 mL 8.9693 mL 17.9385 mL
5 mM 0.3588 mL 1.7939 mL 3.5877 mL
10 mM 0.1794 mL 0.8969 mL 1.7939 mL
溶液配置摩尔浓度计算器
质量   浓度   体积   分子量*  
 =   x   x 
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(参考来源于公开文献
小鼠 大鼠 豚鼠 仓鼠
重量 (kg) 0.02 0.15 1.8 0.4 0.08 10
体表面积 (m2) 0.007 0.025 0.15 0.05 0.02 0.5
Km 系数 3 6 12 8 5 20
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×  动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

参考文献

[1] Iñigo Terrén, et al. Methods Enzymol. CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro

[2] Jiang X, et al. Oncoimmunology. Long-lived pancreatic ductal adenocarcinoma slice cultures enable precise study of the immune microenvironment.

[3] Stempin CC, et al. PLoS Negl Trop Dis. GRAIL and Otubain-1 are Related to T Cell Hyporesponsiveness during Trypanosoma cruzi Infection.

[4] Edwin D Hawkins, et al. Nat Protoc. Measuring lymphocyte proliferation, survival and differentiation using CFSE time-series data

[5] Ben J C Quah, et al. Nat Protoc. Monitoring lymphocyte proliferation in vitro and in vivo with the intracellular fluorescent dye carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester

[6] Wang XQ, et al. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester fluorescent dye for cell labeling.

[7] M E Fuller, et al. Appl Environ Microbiol. Development of a vital fluorescent staining method for monitoring bacterial transport in subsurface environments

[8] Graziano M, et al. Exp Cell Res. The fate of thymocytes labeled in vivo with CFSE.

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