CellTracker Blue CMAC (7-氨基-4-氯甲基香豆素)是一种新型的硫醇敏感染料,同时也是谷胱甘肽敏感探针,并能稳定地附着且长时间跟踪细胞 (λex=372 nm, λem=470 nm)。
别名:7-Amino-4-chloromethylcoumarin
CellTracker Blue CMAC (7-氨基-4-氯甲基香豆素)是一种新型的硫醇敏感染料,同时也是谷胱甘肽敏感探针,并能稳定地附着且长时间跟踪细胞 (λex=372 nm, λem=470 nm)。
一般来说,长期染色(≥3天)或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验(比如活力测定),使用低浓度染料(0.5-5µM)。探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影,尽可能使用低浓度的染料。
使用说明(仅供参考):
制备Cell-Tracker染色工作液
① 开瓶前将产品从冰箱取出,放到室温使其回温至少20min。
② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为25mM。例如,对5mg Cell-Tracker Blue CMAC(Mw: 209.63 g/mol)粉末,加入954µl DMSO充分溶解,即得到25mM母液。储存液根据单次用量分装避光冻存,减少反复冻融次数。
③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。
悬浮细胞染色步骤
① 离心收集细胞,吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。
② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。
③ 离心细胞,吸掉Cell-Tracker染色工作液。
④ 加入选择的培养基,将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。
⑤ 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。
贴壁细胞染色步骤
① 吸走培养基。
② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。
③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。
④ 吸掉Cell-Tracker染色工作液。
⑤ 加入选择的培养基。
⑥ 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。
分子量 | 209.63 |
分子式 | C10H8ClNO2 |
CAS号 | 147963-22-2 |
性状 | Solid |
溶解性(25°C) | DMSO >100 mg/mL |
储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年;4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月;-20°C 1个月 |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 4.7703 mL | 23.8515 mL | 47.7031 mL |
5 mM | 0.9541 mL | 4.7703 mL | 9.5406 mL |
10 mM | 0.477 mL | 2.3852 mL | 4.7703 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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