Calcein(钙黄绿素) 是一种荧光染料和自灭探针,也可作 EDTA 钙离子滴定和荧光测定钙离子的络合指示剂。
分子量 | 622.53 |
分子式 | C30H26N2O13 |
CAS号 | 1461-15-0 |
中文名称 | 钙黄绿素 |
溶解性 | DMSO 80 mg/mL |
储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
Calcein 是一种荧光染料和自灭探针,也可作 EDTA 钙离子滴定和荧光测定钙离子的络合指示剂。荧光染料中的锰离子与钙黄绿素结合导致荧光淬灭,同时染料颜色为橙色。当扩增反应形成焦磷酸根离子时,锰离子与焦磷酸根离子结合形成焦磷酸锰,引起荧光信号的产生,同时染料颜色变为黄绿色。钙黄绿素目前已广泛应用于恒温扩增反应的荧光检测。
钙黄绿素染色使用方法(仅供参考)
1、用DMSO制备1 mM 的钙黄绿素溶液,并用PBS将其稀释制成1~50 μM的钙黄绿素溶液。
2、将1/10细胞培养基体积的钙黄绿素溶液加入到细胞培养基中。
3、在37℃培养细胞15-30分钟。
4、用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
5、用490 nm激发波长,515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
【注意】:
a、如果钙黄绿素溶液很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如Pluronic F127。
b、非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.6063 mL | 8.0317 mL | 16.0635 mL |
5 mM | 0.3213 mL | 1.6063 mL | 3.2127 mL |
10 mM | 0.1606 mL | 0.8032 mL | 1.6063 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。