BODIPY TR Ceramide (Golgi-Red Tracke) 是一种高尔基体特异性荧光染料,可实现单个细胞可视化。高尔基体荧光探针是一种 BODIPY 标记的神经酰胺衍生物。神经酰胺的合成发生在内质网,高尔基体荧光探针可以通过神经酰胺转运蛋白(CERT)或囊泡转运输送到高尔基体,从而实现染料的特异性标记。Ex/Em=589 nm/616 nm
分子量 | 705.7 |
分子式 | C39H50BF2N3O4S |
CAS号 | 571186-05-5 |
溶解性 | DMSO 30 mg/mL |
储存条件 | -20°C, protect from light, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
BODIPY TR Ceramide (Golgi-Red Tracke) 是一种高尔基体特异性荧光染料,可实现单个细胞可视化。高尔基体荧光探针是一种 BODIPY 标记的神经酰胺衍生物。神经酰胺的合成发生在内质网,高尔基体荧光探针可以通过神经酰胺转运蛋白(CERT)或囊泡转运输送到高尔基体,从而实现染料的特异性标记。Ex/Em=589 nm/616 nm
使用方法(仅供参考)
1.Golgi 工作液配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 5 mM 储备液。
注意:建议将储备液在 -20°C 或 -80°C 避光保存,避免反复冻融循环。
1.2 工作液的配制
用预热好的 PBS 或培养基溶液,配制成 1-10 μM 的 Golgi 工作液。
注:请根据实际情况调整 Golgi 1-43 工作液浓度,且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 收集细胞:1,000 g,4°C,离心 3-5 分钟,弃去上清。加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。
2.2 加入 1 mL Golgi 工作液,室温孵育 20-30 分钟。
2.3 400 g,4°C,离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育20-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液,用培养基洗 2 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.417 mL | 7.0852 mL | 14.1703 mL |
5 mM | 0.2834 mL | 1.417 mL | 2.8341 mL |
10 mM | 0.1417 mL | 0.7085 mL | 1.417 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。