6-CFDA 是一种常见的脂肪族荧光素系列物。CFDA 可在细胞内自由扩散,并被细胞内非特异性脂肪酶水解生成羧基荧光素 (CF)。
别名:6-Carboxyfluorescein diacetate
6-CFDA 是一种常见的脂肪族荧光素系列物。CFDA 可在细胞内自由扩散,并被细胞内非特异性脂肪酶水解生成羧基荧光素 (CF)。
6-CFDA 工作液的配制
1.制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 6-CFDA。如用0.2172 mL DMSO 溶解 1 mg 6-CFDA。
注:6-CFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
2.配制工作液
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 1-10 μM 的 6-CFDA 工作液。
注:请根据实际情况调整 6-CFDA 工作液浓度,且现用现配。
细胞染色
1.细胞制备:
悬浮细胞:离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
2.加入 1 mL 6-CFDA 工作液,室温孵育 15 分钟。
3.400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
4.加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
5.用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。
注意事项
1. 6-CFDA 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,避免反复冻融。-20℃ 可保存 1 个月,-80℃ 可保存半年。
2. 请根据实际情况调整 6-CFDA 工作液浓度。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
分子量 | 460.39 |
分子式 | C25H16O9 |
CAS号 | 3348-03-6 |
溶解性(25°C) | DMSO 90 mg/mL |
储存条件 | -20°C, protect from light |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 2.1721 mL | 10.8604 mL | 21.7207 mL |
5 mM | 0.4344 mL | 2.1721 mL | 4.3441 mL |
10 mM | 0.2172 mL | 1.086 mL | 2.1721 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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