6-CFDA 是一种常见的脂肪族荧光素系列物。CFDA 可在细胞内自由扩散,并被细胞内非特异性脂肪酶水解生成羧基荧光素 (CF)。
分子量 | 460.39 |
分子式 | C25H16O9 |
CAS号 | 3348-03-6 |
中文名称 | 6-羧基荧光素二醋酸 |
溶解性 | DMSO 90 mg/mL |
储存条件 | -20°C, protect from light |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
6-CFDA 是一种常见的脂肪族荧光素系列物。CFDA 可在细胞内自由扩散,并被细胞内非特异性脂肪酶水解生成羧基荧光素 (CF)。
6-CFDA 工作液的配制
1.制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 6-CFDA。如用0.2172 mL DMSO 溶解 1 mg 6-CFDA。
注:6-CFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
2.配制工作液
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 1-10 μM 的 6-CFDA 工作液。
注:请根据实际情况调整 6-CFDA 工作液浓度,且现用现配。
细胞染色
1.细胞制备:
悬浮细胞:离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
2.加入 1 mL 6-CFDA 工作液,室温孵育 15 分钟。
3.400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
4.加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
5.用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。
注意事项
1. 6-CFDA 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,避免反复冻融。-20℃ 可保存 1 个月,-80℃ 可保存半年。
2. 请根据实际情况调整 6-CFDA 工作液浓度。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 2.1721 mL | 10.8604 mL | 21.7207 mL |
5 mM | 0.4344 mL | 2.1721 mL | 4.3441 mL |
10 mM | 0.2172 mL | 1.086 mL | 2.1721 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。