CCCP是一种强效的线粒体氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡(apoptosis)发生。CCCP 诱导 PINK1 激活,促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。
别名:Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone; Carbonyl Cyanide m-Chlorophenylhydrazone
CCCP是一种质子离子线粒体解偶联剂,其增加膜对质子的渗透性,导致线粒体膜电位的破坏。CCCP 诱导 PINK1 激活,促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。当分别以110和35nM的浓度使用时,它抑制线粒体呼吸和ATP酶活性。当在RAW 264.7细胞中以50μM的浓度使用时,CCCP抑制干扰素基因(STING)刺激的激活,降低下游STING靶标(包括IFN-β,TBK1和IRF3)的表达。它以依赖于GTP酶Drp1的方式诱导线粒体分裂。CCCP也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用。CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1或者JC-10来进行相关研究。
使用方法
1. CCCP(10 mM)按照10-50µl的小量分装,冻存在-20℃,避免反复冻融。
2. 对于大部分的细胞培养体系,可按照200×稀释起始浓度(如5µl起始母液加入1ml细胞培养液,也就是50µM)进行凋亡诱导20分钟,随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测,呈绿色荧光。
注意:对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需参考相关文献资料决定。
分子量 | 204.62 |
分子式 | C9H5ClN4 |
CAS号 | 555-60-2 |
溶解性(25°C) | DMSO ≥ 25 mg/mL |
储存条件 | -20°C, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 4.8871 mL | 24.4355 mL | 48.8711 mL |
5 mM | 0.9774 mL | 4.8871 mL | 9.7742 mL |
10 mM | 0.4887 mL | 2.4436 mL | 4.8871 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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