Phalloidin-Fluor 647 Conjugate 别名：鬼笔环肽-Fluor 647标记

目录号 M59034

鬼笔环肽-Fluor 647 能特异性结合F-肌动蛋白。该衍生物在纳摩尔浓度下即可作为高效探针，用于标记、鉴定和定量分析经甲醛固定透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白。Ex (nm) 656，Em (nm) 670

规格	价格	库存状态
300 Tests	¥ 4320	现货

*AbMole所有产品仅供有资质的科研机构或医药企业进行科学研究或药证申报用途，不能被用于人体和任何其它用途。我们不向任何个人或非科研性质的机构提供产品和服务。

质量标准及产品资料

化学性质/溶解性/储存

分子量	1408.65
中文名称	鬼笔环肽-Fluor 647标记
溶解性（仅列举部分溶剂）	DMSO
储存条件	-20°C, protect from light, sealed
运输方式	冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。

生物活性

鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体的结合要紧密得多，从而导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数降低，从而通过防止丝解聚而基本稳定了肌动蛋白丝。而且，发现鬼笔环肽抑制F-肌动蛋白的ATP水解活性。鬼笔环肽在细胞中不同浓度下的功能不同。当以低浓度引入细胞质时，鬼笔环肽将聚合度较低的胞质肌动蛋白和纤维蛋白吸收到聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”中，但它不会干扰应力纤维，即厚的微丝束。鬼笔环肽的性质是研究F-肌动蛋白在细胞中分布的有效工具，方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并将其用于染色肌动蛋白丝以进行光学显微镜观察。鬼笔环肽的荧光衍生物已被证明在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率研究肌动蛋白网络的重要工具。我们提供的鬼笔环肽-Fluor 647是AF647鬼笔环肽的替代品。

实验方案

样品分析方案

概述

1.将样本置于微孔板孔中

2.吸弃孔内液体

3.每孔加入100 μL鬼笔环肽-Fluor 647标记液

4.室温避光孵育20–90分钟

5.清洗细胞去除未结合染料

6.使用Cy5滤光片进行荧光显微镜观察

注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。

储存条件

-20℃避光保存可稳定至少6个月，避免反复冻融

鬼笔环肽具毒性（半数致死量LD50=2 mg/kg），虽单管含量极低（仅对蚊虫可能致命），仍需谨慎操作

储备液配制

除特别说明外，所有未使用的储备液分装为单次使用等份，配制后保存于-20°C，避免反复冻融

鬼笔环肽-Fluor 647标记储备液

取30µL二甲基亚砜（DMSO）加入冻干粉中，充分混匀。

工作溶液配置

鬼笔环肽-Fluor 647标记工作溶液

取1 µL鬼笔环肽-Fluor 647标记原液加入1 mL含1% BSA的PBS缓冲液中混匀。

注意1. 鬼笔环肽标记原液需分装后-20℃避光保存

2.不同细胞类型染色效果可能存在差异，建议根据实际情况调整工作液浓度

样本实验操作流程

细胞染色

1.使用3.0-4.0%甲醛PBS溶液室温固定细胞10-30分钟

注意：避免使用含甲醇固定剂，甲醇会破坏肌动蛋白结构。推荐使用无甲醇甲醛固定剂

2.PBS缓冲液洗涤固定后细胞2-3次

可选：为提高通透性，可加入0.1% Triton X-100 PBS溶液处理3-5分钟，之后用PBS洗涤2-3次

3.向96孔板每孔加入100 μL鬼笔环肽-Fluor 647工作液，室温避光染色20-90分钟

4.用PBS轻柔洗涤2-3次去除多余标记物，封片后使用Cy5滤光片组进行荧光显微镜观察

实验参考

蛋白/细胞实验

下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

浓度/溶剂体积/质量	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	0.7099 mL	3.5495 mL	7.099 mL
5 mM	0.142 mL	0.7099 mL	1.4198 mL
10 mM	0.071 mL	0.3549 mL	0.7099 mL

*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。

质量		浓度		体积		分子量*
	=		x		x

动物实验

建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。