MitoSOX Red 别名：Mitochondrial Superoxide Indicator; 红色线粒体超氧化物荧光探针
红色线粒体超氧化物荧光探针 (MitoSOX Red) 是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针，具细胞膜渗透性，与核酸结合后产生很强的红色荧光，可用于特异性检测超氧化物。其最大激发/发射波长为510/580nm。
CAS No.：1003197-00-9
Nat Commun. 2023 Sep 2;14(1):5360.
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 759.70 |
| 分子式 | C43H43IN3P |
| CAS号 | 1003197-00-9 |
| 中文名称 | 红色线粒体超氧化物荧光探针 |
| 溶解性 | DMSO 60 mg/mL |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
红色线粒体超氧化物荧光探针 (MitoSOX Red) 是二氢乙啶的一种阳离子衍生物，特别设计高度特异性检测活细胞内线粒体超氧化物。是一种特异性靶向活细胞线位体的新型荧光探针，具细胞膜渗透性，且能快速和选择性结合线粒体，一旦进入线粒体，被超氧化物氧化，与核酸结合后产生很强的红色荧光。其最大激发/发射波长为510/580nm。
使用方法
1. 储存液制备(5mM)
本品是以粉末形式提供，使用前需将本品回温至室温。
向 50 µg MitoSOX Red 中加入 13 µL 无水DMSO，溶解混匀即可配制成 5 mM 的储存液。储存液可按照单次用量分装，在≤-20℃避光保存，避免反复冻融。
2. 操作方法
不同的实验目的使用不同的探针浓度，以下的起始操作条件仅作参考， 可根据细胞类型和其他的相关因素进行适当调整。
2.1) 5 µM 工作液的配制
用合适缓冲液(如 HBSS，含 Ca2+ 、Mg2+ ) 1000 倍稀释上述 MitoSOX Red 5 mM 储存液至 其终浓度为 5 µM。
【注】MitoSOX Red 工作液浓度不要超过 5 µM，否则可能会有细胞毒性，包括改变线粒体形态和荧光素重新分配到细胞核和细胞质等。
2.2) 加载细胞：加入 1-2 mL 5µM MitoSOX Red工作液充分覆盖爬片生长的细胞，于 37 °C 避光孵育 10 min。
2.3) 清洗：用预热的合适缓冲液轻洗细胞 3 次。
2.4) 观察：按需加入合适的复染液对细胞进行复染，封片后进行荧光成像（Ex/Em=510/580nm）观察。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.3163 mL | 6.5815 mL | 13.1631 mL |
| 5 mM | 0.2633 mL | 1.3163 mL | 2.6326 mL |
| 10 mM | 0.1316 mL | 0.6582 mL | 1.3163 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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参考文献
