红色线粒体超氧化物荧光探针(MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator)是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针,具细胞膜渗透性,与核酸结合后产生很强的红色荧光,可用于特异性检测超氧化物。其最大激发/发射波长为510/580nm。
红色线粒体超氧化物荧光探针(MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator)是二氢乙啶的一种阳离子衍生物,特别设计高度特异性检测活细胞内线粒体超氧化物。是一种特异性靶向活细胞线位体的新型荧光探针,具细胞膜渗透性,且能快速和选择性结合线粒体,一旦进入线粒体,被超氧化物氧化,与核酸结合后产生很强的红色荧光。其最大激发/发射波长为510/580nm。
使用方法
1. 储存液制备(5mM)
本品是以粉末形式提供,使用前需将本品回温至室温。
向 50 µg MitoSOX Red 中加入 13 µL 无水DMSO,溶解混匀即可配制成 5 mM 的储存液。储存液可按照单次用量分装,在≤-20℃避光保存,避免反复冻融。
2. 操作方法
不同的实验目的使用不同的探针浓度,以下的起始操作条件仅作参考, 可根据细胞类型和其他的相关因素进行适当调整。
2.1) 5 µM 工作液的配制
用合适缓冲液(如 HBSS,含 Ca2+ 、Mg2+ ) 1000 倍稀释上述 MitoSOX Red 5 mM 储存液至 其终浓度为 5 µM。
【注】MitoSOX Red 工作液浓度不要超过 5 µM,否则可能会有细胞毒性,包括改变线粒体形态和荧光素重新分配到细胞核和细胞质等。
2.2) 加载细胞:加入 1-2 mL 5µM MitoSOX Red工作液充分覆盖爬片生长的细胞,于 37 °C 避光孵育 10 min。
2.3) 清洗:用预热的合适缓冲液轻洗细胞 3 次。
2.4) 观察:按需加入合适的复染液对细胞进行复染,封片后进行荧光成像(Ex/Em=510/580nm)观察。
Nat Commun. 2023 Sep 2;14(1):5360.
分子量 | 759.71 |
分子式 | C43H43N3IP |
溶解性(25°C) | DMSO: 5mM |
储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|---|---|---|
1 mM | 1.3163 mL | 6.5815 mL | 13.1629 mL |
5 mM | 0.2633 mL | 1.3163 mL | 2.6326 mL |
10 mM | 0.1316 mL | 0.6581 mL | 1.3163 mL |
小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
其他相关的Fluorescent Dye产品 |
---|
FM1-43
FM1-43 是一种亲脂性很强的水溶性苯乙烯染料,能特异性结合细胞膜和内膜细胞器产生荧光。FM1-43 广泛用于内吞和外显膜结构标记。 |
BCIP
BCIP是一种显色底物,可用于碱性磷酸酶活性的比色法检测。 |
MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, amide
MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, amide 是一种基于荧光共振能量转移 FRET 技术的底物。 |
MeOSuc-AAPV-AMC
MeOSuc-AAPV-AMC is a fluorogenic substrate for human leukocyte and porcine pancreatic elastase (Km: 362 μM, Ex=380 nm, Em=460 nm).。 |
Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) (200-208)
Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) (200-208) 是一种标记基因产物,源自维多利亚水母 (Aequorea Victoria)。 |
产品仅供科学研究或药证申报的用途使用,不为任何个人或者非科研性质的其他用途提供服务。
Copyright © 2010-2022 AbMole版权所有 沪ICP备16047849号 沪公网安备 31011502012228号