MitoSOX Red 别名：Mitochondrial Superoxide Indicator; 红色线粒体超氧化物荧光探针
红色线粒体超氧化物荧光探针 (MitoSOX Red) 是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针，具细胞膜渗透性，与核酸结合后产生很强的红色荧光，可用于特异性检测超氧化物。其最大激发/发射波长为510/580nm。
CAS No.：1003197-00-9
EBioMedicine. 2026 Feb 05;125:106146.
J Nanobiotechnology. 2025 Oct 10;23(1):652.
Nat Commun. 2023 Sep 2;14(1):5360.
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 759.70 |
| 分子式 | C43H43IN3P |
| CAS号 | 1003197-00-9 |
| 中文名称 | 红色线粒体超氧化物荧光探针 |
| 溶解性（仅列举部分溶剂） | DMSO 60 mg/mL |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
生物活性
红色线粒体超氧化物荧光探针 (MitoSOX Red) 是二氢乙啶的一种阳离子衍生物，特别设计高度特异性检测活细胞内线粒体超氧化物。是一种特异性靶向活细胞线位体的新型荧光探针，具细胞膜渗透性，且能快速和选择性结合线粒体，一旦进入线粒体，被超氧化物氧化，与核酸结合后产生很强的红色荧光。其最大激发/发射波长为510/580nm。
使用方法
1. 储存液制备(5mM)
本品是以粉末形式提供，使用前需将本品回温至室温。
向 50 µg MitoSOX Red 中加入 13 µL 无水DMSO，溶解混匀即可配制成 5 mM 的储存液。储存液可按照单次用量分装，在≤-20℃避光保存，避免反复冻融。
2. 操作方法
不同的实验目的使用不同的探针浓度，以下的起始操作条件仅作参考， 可根据细胞类型和其他的相关因素进行适当调整。
2.1) 5 µM 工作液的配制
用合适缓冲液(如 HBSS，含 Ca2+ 、Mg2+ ) 1000 倍稀释上述 MitoSOX Red 5 mM 储存液至 其终浓度为 5 µM。
【注】MitoSOX Red 工作液浓度不要超过 5 µM，否则可能会有细胞毒性，包括改变线粒体形态和荧光素重新分配到细胞核和细胞质等。
2.2) 加载细胞：加入 1-2 mL 5µM MitoSOX Red工作液充分覆盖爬片生长的细胞，于 37 °C 避光孵育 10 min。
2.3) 清洗：用预热的合适缓冲液轻洗细胞 3 次。
2.4) 观察：按需加入合适的复染液对细胞进行复染，封片后进行荧光成像（Ex/Em=510/580nm）观察。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.3163 mL | 6.5815 mL | 13.1631 mL |
| 5 mM | 0.2633 mL | 1.3163 mL | 2.6326 mL |
| 10 mM | 0.1316 mL | 0.6582 mL | 1.3163 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
延伸阅读 （仅做信息扩展，不作实验参考）
活性氧（ROS）的过量产生是细胞损伤和多种病理过程的核心驱动因素，而线粒体作为细胞能量代谢的中心，是超氧化物的主要来源。MitoSOX Red（红色线粒体超氧化物荧光探针，AbMole，M19992）是一种靶向线粒体的特异性荧光探针，MitoSOX Red的设计是基于二氢乙啶（DHE）骨架与三苯基膦阳离子，其中三苯基膦阳离子赋予了该染料线粒靶向聚集能力，DHE则负责检测超氧化物[1]。MitoSOX Red（CAS No.：1003197-00-9）进入线粒体后，能被超氧化物特异性氧化为氧化乙啶，产生强烈的红色荧光（激发/发射波长约为510/580 nm），该反应对超氧化物具有高度选择性，不易被其他ROS（如过氧化氢、羟自由基）或活性氮（RNS）干扰[1]。MitoSOX Red（红色线粒体超氧化物荧光探针，AbMole，M19992）的荧光强度与线粒体超氧化物水平呈正相关，可通过流式细胞术、共聚焦显微镜或酶标仪进行定量检测。
MitoSOX Red在多种细胞模型中的检测灵敏度已得到充分验证：在RAW264.7巨噬细胞中，LPS（脂多糖）刺激细胞30分钟，随后用5 μM的MitoSOX Red孵育10分钟即可获得清晰的荧光信号；HepG2细胞经H₂O₂（100–500 μM）或棕榈酸（200 μM）处理后，MitoSOX Red的荧光强度显著增加，且该信号可被线粒体靶向抗氧化剂MitoTEMPO 显著抑制[2]。在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中，MPP⁺ （1-methyl-4-phenylpyridinium，一种帕金森病造模剂）处理细胞后，MitoSOX Red荧光信号增强，并且线粒体膜电位出现去极化的情况，提示上述细胞存在氧化应激，并因此导致线粒体功能障碍[3]。原代心肌细胞中，缺氧/复氧处理后MitoSOX Red荧光强度升高，且与caspase-3激活和细胞凋亡呈正相关[4]。
MitoSOX Red（CAS No.：1003197-00-9）同样可用于动物组织切片的检测。通过灌流或组织切片孵育MitoSOX Red（5–20 μM，30分钟）实现线粒体超氧化物的原位检测，并且已应用于小鼠脑缺血模型、糖尿病肾病模型及衰老模型中线粒体氧化应激水平的评估[5]。与常规ROS探针相比，MitoSOX Red的线粒体靶向性和超氧化物特异性使其在线粒体氧化还原状态研究中具有不可替代的优势。
参考文献及鸣谢
[1] Robinson, K. M.; Janes, M. S.; Pehar, M.; et al. Selective fluorescent imaging of superoxide in vivo using ethidium-based probes. Proceedings of the National Academy of Sciences 2006, 103 (41), 15038–15043.
[2] Mukhopadhyay, P.; Rajesh, M.; Yoshihiro, K.; et al. Simple quantitative detection of mitochondrial superoxide production in live cells. Biochemical and Biophysical Research Communications 2007, 358 (1), 203–208.
[3] Dikalov, S. I.; Harrison, D. G. Methods for detection of mitochondrial and cellular reactive oxygen species. Antioxidants & Redox Signaling 2014, 20 (2), 372–382.
[4] Zielonka, J.; Kalyanaraman, B. Hydroethidine- and MitoSOX-derived red fluorescence is not a reliable indicator of intracellular superoxide formation: another inconvenient truth. Free Radical Biology and Medicine 2010, 48 (8), 983–1001.
[5] Zielonka, J.; Sarna, T.; Roberts, J. E.; et al. Pulse radiolysis and steady-state analyses of the reaction between hydroethidine and superoxide and other oxidants. Archives of Biochemistry and Biophysics 2006, 456 (1), 39–47.
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参考文献
以上参考文献由AI整理，仅供参考，AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。
