Mitochondrion Tracker Orange CMTMRos (同MitoTracker Orange CMTMRos) 是一种荧光染料,利用线粒体膜电位标记活细胞内的线粒体 (Ex/Em: 551/576 nm)。
| 分子量 | 427.37 |
| 分子式 | C24H24Cl2N2O |
| CAS号 | 199116-50-2 |
| 溶解性(仅列举部分溶剂) | DMSO 25 mg/mL |
| 储存条件 | 4°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同,具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
Mitochondrion Tracker Orange CMTMRos (同MitoTracker Orange CMTMRos) 是一种荧光染料,利用线粒体膜电位标记活细胞内的线粒体 (Ex/Em: 551/576 nm)。
对于活细胞,请按照步骤 1-7 操作。对于固定细胞,请按照步骤 8-13 操作。
1. 在所需的细胞培养基中配制浓度为 25-500 nM 的标记溶液,并将其加热至细胞培养温度。
2. 从盖玻片上生长的细胞中吸出培养基。
3. 将细胞浸入标记培养基中,37°C 孵育 15-45 分钟。
4. 吸出标记培养基,并用培养基冲洗细胞三次。
5. 封片细胞。
6. 使用荧光显微镜检查细胞。如果荧光染色过低,请尝试以下方法之一:
i. 在正常培养基中再孵育 30 分钟,使硫醇结合得以进行。
ii. 尝试提高标记溶液的初始浓度。
7. 当荧光充足时,对细胞进行成像。
8. 重复步骤 1-4,但使用工作浓度在 100 至 1000 nM 之间的标记溶液。
9. 用 PBS 冲洗细胞三次。
10. 将细胞在含 3.7% 甲醛的 PBS (pH 7.4) 中固定 10 分钟。
11. 吸干细胞,用 PBS 冲洗三次,每次 5 分钟。
12. 盖上盖玻片。
13. 对细胞进行成像。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.3399 mL | 11.6995 mL | 23.3989 mL |
| 5 mM | 0.468 mL | 2.3399 mL | 4.6798 mL |
| 10 mM | 0.234 mL | 1.1699 mL | 2.3399 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。