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Fluo-8 AM 钙荧光探针FLUO-8, AM

目录号 M15051 所有产品仅供科研使用,严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务  


Fluo-8 AM 是一种钙荧光探针,可以加载到原生质体中检测组织细胞中的钙。最大激发/发射波长为495nm/516nm,需-15℃以下避光保存。Fluo-8 AM 是目前最亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Fluo-8,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。

Fluo-8 AM 结构式
规格 价格 库存状态
50ug ¥ 1200 中国库存现货
250ug ¥ 2880 中国库存现货
1mg ¥ 7200 中国库存现货
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质量标准及产品资料
生物活性

Fluo-8 AM 是一种钙荧光探针,可以加载到原生质体中检测组织细胞中的钙。最大激发/发射波长为495nm/516nm,需-15℃以下避光保存。Fluo-8 AM 是目前最亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Fluo-8,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。


使用说明(仅供参考)

1、储备溶液配制

Fluo-8 AM 在高质量无水 DMSO (M49899) 中制备 2 至 5 mM Fluo-8 AM 储备溶液。


2、工作溶液配制

在实验当天,将 Fluo-8 AM 溶解在 DMSO 中或将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。使用 0.04% Pluronic F-127 在您选择的缓冲液(例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液)中制备 2 至 20 µM 的染料工作溶液。对于大多数细胞系,建议使用终浓度为 4-5 μM 的 Fluo-8 AM。必须根据经验确定细胞加载所需的确切指示剂浓度。

注意:非离子洗涤剂 Pluronic F-127 (M3825) 有时用于增加 Fluo-8 AM 的水溶性,防止Fluo-8 AM在溶液中聚合并促使探针更好进入细胞。可以从AbMole进行购买。

注意:如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,则可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中(孔中的终浓度为 0.5-1 mM)以减少去酯化指示剂的泄漏。丙磺舒偏碱性,因此加入培养基后可能需要重新调整pH。


3、操作步骤

1) 在生长培养基中制备细胞过夜。

2) 第二天,将 1X Fluo-8 AM 工作溶液添加到您的细胞板中。

注意:如果您的化合物会干扰血清,请在加载染料之前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。

3) 在 37°C 的细胞培养箱中孵育 30 到 60 分钟。

注意:将染料孵育 2 小时以上可以提高某些细胞系的信号强度。

4) 用 HHBS 或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如 1 mM 丙磺舒)替换染料工作溶液,以去除任何多余的探针。

5) 根据需要添加刺激物,并使用配备有 FITC 滤光片组的荧光显微镜或 FDSS、FLIPR 或 FlexStation的荧光板读取器在 490/525 nm 截止波长 515 nm 处检测荧光。


使用AbMole产品发表的文献
化学性质
分子量 1046.93
分子式 C50H50N2O23
CAS号 1345980-40-6
溶解性(25°C) DMSO 15 mg/mL
储存条件 -15°C, protect from light
运输方式 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。
储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9552 mL 4.7759 mL 9.5517 mL
5 mM 0.191 mL 0.9552 mL 1.9103 mL
10 mM 0.0955 mL 0.4776 mL 0.9552 mL
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(参考来源于公开文献
小鼠 大鼠 豚鼠 仓鼠
重量 (kg) 0.02 0.15 1.8 0.4 0.08 10
体表面积 (m2) 0.007 0.025 0.15 0.05 0.02 0.5
Km 系数 3 6 12 8 5 20
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×  动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

参考文献

[1] Lina Qiu, et al. Hortic Res. Loading calcium fluorescent probes into protoplasts to detect calcium in the flesh tissue cells of Malus domestica

[2] Thore Schade-Mann, et al. Hear Res. Calcium signaling in interdental cells during the critical developmental period of the mouse cochlea

[3] Andrea E Morrell, et al. Connect Tissue Res. Mechanosensitive Ca 2+ signaling and coordination is diminished in osteocytes of aged mice during ex vivo tibial loading

[4] Sebastian Rhl, et al. Science. ESCRT-dependent membrane repair negatively regulates pyroptosis downstream of GSDMD activation

[5] Noritaka Nakamichi, et al. Biol Pharm Bull. Screening to Identify Multidrug Resistance-Associated Protein Inhibitors with Neuroblastoma-Selective Cytotoxicity

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