DiI 即 DiIC18(3) 是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。最大激发波长为 549 nm,最大发射波长为 565 nm。通常用作神经元和其它细胞的长期示踪剂。
Nat Commun. 2025 Aug 04;16(1):7166.
Chemical Engineering Journal. 2025 Oct 21.
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Multifunctional nanoparticles for immune regulation and oxidative stress alleviation in myocarditis
Inorg Chem. 2023 Oct 9.
J Nanobiotechnology. 2021 Nov 25;19(1):391.
| 分子量 | 933.87 |
| 分子式 | C59H97ClN2O4 |
| CAS号 | 41085-99-8 |
| 溶解性(仅列举部分溶剂) | DMSO 5 mM Ethanol 5 mM |
| 储存条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。 |
*不同实验中用到的溶剂可能不同,具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。
DiI 即 DiIC18(3) 是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。最大激发波长为 549 nm,最大发射波长为 565 nm。通常用作神经元和其它细胞的长期示踪剂。
操作说明(仅供参考)
1、染色液制备
1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。
2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。
2、悬浮细胞染色
1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
2)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。
4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5)重复 3,4 步骤两次以上。
3、贴壁细胞染色
1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
4、显微镜检测
1)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a)DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b)DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c)DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005。
5、流式细胞仪检测
DiO、DiI、DiD、DiR染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.0708 mL | 5.3541 mL | 10.7081 mL |
| 5 mM | 0.2142 mL | 1.0708 mL | 2.1416 mL |
| 10 mM | 0.1071 mL | 0.5354 mL | 1.0708 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的DMSO;
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时,尽量参考已发表的相关实验文献(溶剂种类及配比众多,简单地溶解目的化合物,并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题,未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用)。
体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过超声和(或)加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中,输入您的动物实验相关数据并点击计算,即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg,平均每只动物的体重为20 g,每只动物的给药体积是100 μL,动物数量为20只,则该动物实验的总需药量为4 mg,工作液终浓度为2 mg/mL。
1:鉴于实验过程的损耗,建议您至少多配1-2只动物的量;
2:为该产品最终给药时的浓度。
以上参考文献由AI整理,仅供参考,AbMole 尚未独立确认这些文献的准确性。