Dihydroethidium 别名：Hydroethidine; PD-MY 003; DHE; 二氢乙锭
Dihydroethidium（DHE，二氢乙锭）是检测细胞内超氧化物阴离子水平最常用的荧光探针。Dihydroethidium 可穿透细胞膜，形成荧光蛋白复合物，发出蓝色荧光。Dihydroethidium 进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的染色效果最强。Dihydroethidium 产生固有的蓝色荧光，最大激发波长为 370 nm，最大发射波长为 420 nm；Dihydroethidium 脱氢后和 RNA 或 DNA 结合产生红色荧光，最大激发波长为 300 nm，最大发射波长为 610 nm，在实际观察时也可以使用 535 nm 作为激发波长。
CAS No.：104821-25-2
Drug Dev Res. 2025 Jun 03;86(4):e70077.
Irisin Protects Against Diabetic Cardiomyopathy by Suppressing Ferroptosis
Small. 2023 Nov 22;e2306155.
Dual‐Targeted Graphitic Cascade Nanozymes for Recognition and Treatment of Helicobacter pylori
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 315.41 |
| 分子式 | C21H21N3 |
| CAS号 | 104821-25-2 |
| 中文名称 | 二氢乙锭 |
| 溶解性 | DMSO ≥ 45 mg/mL |
| 储存条件 | 2-8°C, protect from light, dry, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后，可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢，产生ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的ethidium较多，红色荧光就较强，反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测。
Dihydroethidium本身为蓝色荧光，最大激发波长为370nm，最大发射波长为420nm，脱氢后和RNA或DNA结合产生红色荧光，最大激发波长为300nm，最大发射波长为610nm，实际观察时也可以使用535nm作为激发波长。
用于细胞内超氧化物阴离子检测时，Dihydroethidium的常用浓度为1-10μM。通常用含有0.5-5μM的Dihydroethidium的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30分钟左右进行荧光探针装载，随后可以适当洗涤，接着可以直接用流式细胞仪或其它适当荧光检测仪器进行检测。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 3.1705 mL | 15.8524 mL | 31.7048 mL |
| 5 mM | 0.6341 mL | 3.1705 mL | 6.341 mL |
| 10 mM | 0.317 mL | 1.5852 mL | 3.1705 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
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参考文献
