BCECF-AM

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BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。

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产品信息

生物活性

BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF-AM本身没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503nm左右，最大发射波长在520nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为488nm，发射波长为535nm。

用于细胞内pH检测时，常用的BCECF-AM的浓度为1～10μM。

使用AbMole产品发表的文献

AMACS Appl Mater Interfaces. 2022 Feb 2;14(4):5033-5052.

Trojan-Horse Diameter-Reducible Nanotheranostics for Macroscopic/Microscopic Imaging-Monitored Chemo-Antiangiogenic Therapy

实验参考

体外实验*
细胞系	HC and CF neutrophils phagosomes of S. aureus
方法	Phagosome pH Measurements The pH of phagosomes of HC and CF neutrophils containing 2′,7′-Bis(2-carboxyethyl)-5 (6)- carboxyfluorescein acetoxymethyl ester (BCECF-AM, 5 μM) labelled S. aureus were assessed. Pasteurized S. aureus (1x10^9 c.f.u) were pre-loaded with BCECF-AM dye (10 µM) for 30 min before removal of excess dye and opsonization with 1% (w/v) human IgG for 30 min. Neutrophils (2 x 10^7) suspended in PBSG pH 7.4 were rapidly stirred in a 37°C thermostatically controlled oxygen electrode chamber. BCECF-AM labelled S. aureus (1 x 10^8 c.f.u.) was added and aliquots removed at indicted time points up to 16 min. The intracellular pH measurements with BCECF were made by determining the pH-dependent ratio of emission intensity (detected at 535 nm) with the dye excited at 490 nm versus the emission intensity at 440 nm and correlated to pH values using an established pH standard curve (range pH 6–8).
浓度	10 µM
处理时间	30 min

*上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

体内实验*
动物模型
配制
剂量
给药处理

*上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

化学性质

分子量	808.69
分子式	C39H36O19
CAS号	117464-70-7
溶解性（25°C）	DMSO
储存条件	-20°C, dry, protect from light, sealed
运输方式	冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	1.2366 mL	6.1828 mL	12.3657 mL
5 mM	0.2473 mL	1.2366 mL	2.4731 mL
10 mM	0.1237 mL	0.6183 mL	1.2366 mL

溶液配置摩尔浓度计算器

质量		浓度		体积		分子量*
	=		x		x

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

	小鼠	大鼠	兔	豚鼠	仓鼠	狗
重量 (kg)	0.02	0.15	1.8	0.4	0.08	10
体表面积 (m²)	0.007	0.025	0.15	0.05	0.02	0.5
K_m 系数	3	6	12	8	5	20

动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×	动物 B的K_m系数
	动物 A的K_m系数

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

参考文献

[1] Elaine Hayes, et al. Front Immunol. Altered Degranulation and pH of Neutrophil Phagosomes Impacts Antimicrobial Efficiency in Cystic Fibrosis

[2] Clark Undem, et al. PLoS One. Endothelin-1 Augments Na⁺/H⁺ Exchange Activity in Murine Pulmonary Arterial Smooth Muscle Cells via Rho Kinase.

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