BCECF-AM
BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。
CAS No.：117464-70-7
AMACS Appl Mater Interfaces. 2022 Feb 2;14(4):5033-5052.
化学性质/溶解性/储存
| 分子量 | 808.69 |
| 分子式 | C39H36O19 |
| CAS号 | 117464-70-7 |
| 溶解性 | DMSO |
| 储存条件 | -20°C, dry, protect from light, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
生物活性
BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF-AM本身没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503nm左右，最大发射波长在520nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为488nm，发射波长为535nm。
用于细胞内pH检测时，常用的BCECF-AM的浓度为1～10μM。
实验参考
下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| 浓度/溶剂体积/质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 1.2366 mL | 6.1828 mL | 12.3657 mL |
| 5 mM | 0.2473 mL | 1.2366 mL | 2.4731 mL |
| 10 mM | 0.1237 mL | 0.6183 mL | 1.2366 mL |
*吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO；
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
| 细胞系 | HC and CF neutrophils phagosomes of S. aureus |
| 方法 | Phagosome pH Measurements The pH of phagosomes of HC and CF neutrophils containing 2′,7′-Bis(2-carboxyethyl)-5 (6)- carboxyfluorescein acetoxymethyl ester (BCECF-AM, 5 μM) labelled S. aureus were assessed. Pasteurized S. aureus (1x10^9 c.f.u) were pre-loaded with BCECF-AM dye (10 µM) for 30 min before removal of excess dye and opsonization with 1% (w/v) human IgG for 30 min. Neutrophils (2 x 10^7) suspended in PBSG pH 7.4 were rapidly stirred in a 37°C thermostatically controlled oxygen electrode chamber. BCECF-AM labelled S. aureus (1 x 10^8 c.f.u.) was added and aliquots removed at indicted time points up to 16 min. The intracellular pH measurements with BCECF were made by determining the pH-dependent ratio of emission intensity (detected at 535 nm) with the dye excited at 490 nm versus the emission intensity at 440 nm and correlated to pH values using an established pH standard curve (range pH 6–8). |
| 浓度 | 10 µM |
| 处理时间 | 30 min |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
建议您制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。
体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。
请在下面的计算器中，输入您的动物实验相关数据并点击计算，即可得到该实验的总需药量和工作液终浓度。
例如您给药剂量是10 mg/kg，平均每只动物的体重为20 g，每只动物的给药体积是100 μL，动物数量为20只，则该动物实验的总需药量为4 mg，工作液终浓度为2 mg/mL。
1：鉴于实验过程的损耗，建议您至少多配1-2只动物的量；
2：为该产品最终给药时的浓度。
| 动物模型 | |
| 配制 | |
| 剂量 | |
| 给药处理 |
* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。
其他相关的Fluorescent Dye产品
