Fluo-4 AM Fluo-4 AM(钙离子荧光探针)

目录号 M3836 所有产品仅供科研使用，严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务

Fluo-4 AM是一种常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针 (λ_ex=494 nm, λ_em=516 nm)。

规格	价格	库存状态
100ug	¥ 1350	中国库存现货
1mg	¥ 7065	中国库存现货

其他规格数量报价？

质量标准及产品资料

纯度： >95%
COA
MSDS

产品信息

生物活性

Fluo-4 AM is a fluorescent dye (λ_ex=494 nm, λ_em=516 nm). Preloaded with Fuo-4 AM, a very bright fluorescence image is observed. In a parallel experiment with fluo-3 AM-loaded cells, the resulting fluorescence image, although clearly discernable in this case, is less bright.

本产品为Fluo-4,AM粉末状，用于细胞内钙离子检测时，Fluo-4, AM的常用浓度为0.5-5 μM。

操作方法（根据文献整理，仅供参考）

1）Fluo-4,AM母液的配制：向 Fluo-4, AM中加入适量DMSO，配制成1-5 mM的储存液，DMSO的加入量根据Fluo-4,AM（MW1096.94）分子量进行计算（如：若配制成1mM的母液，需向50 ug Fluo-4,AM中加入45.6 uL DMSO）。

【注】：溶解用的DMSO需要保证新鲜无水，否则将会导致 AM 体水解，使荧光染料无法进入细胞，影响实验效果。

2）Fluo-4,AM工作液的配制：利用HBSS将Fluo-4,AM稀释成1-5µM的工作液，具体稀释方法如1 mM母液配制1 mL浓度为4 µM工作液，用1 mL HBSS溶液稀释4 µL 1 mM母液即可。

【注】：①推荐该探针加载浓度在4-5 µM，具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基础上尽量使用最低探针浓度。

② Fluo-4,AM工作液需现配现用，避免反复冻存。

3）（可选）如果Fluo-4进入细胞的效果不好，可向 Fluo-4, AM/DMSO 溶液中加入适量20% Pluronic F127溶液，最终稀释至其终浓度为0.04-0.05%，Pluronic F127 可以防止 Fluo-4, AM 在 HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
【注】：Pluronic F127可降低Fluo-4,AM的稳定性，因此只建议在配制工作液时加入，不建议将其加入储存液长期保存。

4）取出预培养的细胞，除去培养基，使用 HBSS 溶液洗涤细胞 3次。
【注】：如果使用含血清的培养基，血清中的酯酶会分解 AM 体，从而降低 Fluo 4-AM 进入细胞的效果。另外含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，所以加工作液之前需尽量去除培养基残留。

5）将 Fluo-4, AM工作液加入细胞，加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养10-60 min，然后除去 Fluo 4-AM 工作液。
【注】：关于孵育的时间，如果首次做实验不能确定，建议先孵育30分钟，看荧光效果：如果细胞死亡较多，适当缩短时间；如果荧光强度太弱，适当延长时间。

6）用HBSS溶液洗涤细胞 3 次，以充分去除残留的 Fluo 4-AM 工作液。然后加入 HBSS 溶液覆盖细胞。

7）37℃培养箱孵育约 20-30 分钟，以确保 AM 体在细胞内的完全去酯化作用。

8）用激光共聚焦或荧光显微镜检测细胞，激发波长 494 nm，发射波长 516 nm。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）Fluo-4,AM 容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。

3）第一次使用时，建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用，以保证实验效果。

4）母液遇水极易分解，如果不能一次用完，建议分装保存，例如分装成5 μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在≤-20℃密封避光保存。

5）建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

化学性质

分子量	1096.94
分子式	C51H50F2N2O23
CAS号	273221-67-3
溶解性（25°C）	DMSO
储存条件	-20°C, dry, protect from light, sealed
运输方式	冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	0.9116 mL	4.5581 mL	9.1163 mL
5 mM	0.1823 mL	0.9116 mL	1.8233 mL
10 mM	0.0912 mL	0.4558 mL	0.9116 mL

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

	小鼠	大鼠	兔	豚鼠	仓鼠	狗
重量 (kg)	0.02	0.15	1.8	0.4	0.08	10
体表面积 (m²)	0.007	0.025	0.15	0.05	0.02	0.5
K_m 系数	3	6	12	8	5	20

动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×	动物 B的K_m系数
	动物 A的K_m系数

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

参考文献

[1] Lina Qiu, et al. Staining the Cytoplasmic Ca2+ with Fluo-4/AM in Apple Pulp

[2] Andrs F Miln, et al. Calibration of mammalian skeletal muscle Ca 2+ transients recorded with the fast Ca 2+ dye Mag-Fluo-4

[3] Ana M Rossi, et al. Reliable measurement of free Ca 2+ concentrations in the ER lumen using Mag-Fluo-4

[4] Kateri J Spinelli, et al. Monitoring intracellular calcium ion dynamics in hair cell populations with Fluo-4 AM

[5] Odmara L Barreto-Chang, et al. Calcium imaging of cortical neurons using Fura-2 AM

获取最新目录册

其他相关的Fluorescent Dye产品
SOSG SOSG (单线态氧绿色荧光探针)，即Singlet Oxygen Sensor Green Fluorescent Probe，或Singlet Oxygen Sensor Green、Singlet Oxygen Sensor Green Reagent，是一种对单线态氧 (Singlet oxygen, 1O2) 具有高度选择性但不具细胞膜通透性的绿色荧光探针，常用于溶液体系中单线态氧的检测、自由基清除剂的功效评估等。
FM1-43 FM1-43 是一种亲脂性很强的水溶性苯乙烯染料，能特异性结合细胞膜和内膜细胞器产生荧光。FM1-43 广泛用于内吞和外显膜结构标记。
BCIP BCIP是一种显色底物，可用于碱性磷酸酶活性的比色法检测。
MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, amide MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, amide 是一种基于荧光共振能量转移 FRET 技术的底物。
MeOSuc-AAPV-AMC MeOSuc-AAPV-AMC is a fluorogenic substrate for human leukocyte and porcine pancreatic elastase (Km: 362 μM, Ex=380 nm, Em=460 nm).。

信号通路

产品类型

Fluo-4 AM Fluo-4 AM(钙离子荧光探针)

目录号 M3836 所有产品仅供科研使用，严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务

质量标准及产品资料

生物活性

化学性质

储备液配制

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

参考文献

AbMole

服务与支持

技术资源

联系我们