DiR染料（DiR碘化物）是一种亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。DiR的深红色荧光可以穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。
DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显：DiI(橙色荧光)，DiO(绿色荧光)，DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiR在活体成像或者示踪中非常有用，因为它们所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。
使用方法：
1. DiR细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。
注意：未使用的储存液保存在-20 °C，避免反复冻融。
(2)工作液制备：用合适的缓冲液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1～5 µM的工作液。
注意：工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3)，(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。
4. 流式细胞仪的检测
DiR染色的细胞可以用经典的FL4流式细胞仪检测。
ACS Nano. 2023 Sep 12;17(17):16770-16786.
J Transl Med. 2023 Jun 12;21(1):383.
Inhalable CAR-T cell-derived exosomes as paclitaxel carriers for treating lung cancer
Biomater Sci. 2022 Sep 13;10(18):5187-5196.
Delivery of enzalutamide via nanoparticles for effectively inhibiting prostate cancer progression
J Nanobiotechnology. 2021 Nov 25;19(1):391.
| 分子量 | 1013.39 |
| 分子式 | C63H101IN2 |
| CAS号 | 100068-60-8 |
| 溶解性（25°C） | DMSO 5mM |
| 储存条件 | -20°C, dry, protect from light, sealed |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 0.9868 mL | 4.9339 mL | 9.8679 mL |
| 5 mM | 0.1974 mL | 0.9868 mL | 1.9736 mL |
| 10 mM | 0.0987 mL | 0.4934 mL | 0.9868 mL |
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
| 重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
| 体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
| Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
| 动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
| 动物 A的Km系数 |
例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数（3），再除以大鼠的Km系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
[4] Hao Liu, et al. In vivo Near-infrared Fluorescence Tumor Imaging Using DiR-loaded Nanocarriers
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