Blasticidin S hydrochloride（灭瘟素S盐酸盐；杀稻瘟菌素盐酸盐）是一种从Streptomyces griseochromogenes中分离的核苷抗生素，可以抑制细菌和真核生物体内的蛋白质合成。
别名：Bla-S; Blasticidin S; Blasticidin S HCl
Blasticidin S hydrochloride是一种从Streptomyces griseochromogenes中分离的核苷抗生素。灭瘟素S属于抗生素，具有真菌属性，通过研究肽键的形成，可以抑制细菌和真核生物体内蛋白质合成，并且可以有效防止稻瘟病病。Blasticidin S (BlaS)灭瘟素S常被用作含有抗癌基因bls, bsr, or BSD癌变细胞的选择性试剂。
应用浓度
1）Escherichia coli
E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差，但是转化子对Blasticidin S具有耐受性，可以用低盐LB培养基（pH 8）进行筛选，浓度范围为50-100 μg/mL Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2）哺乳动物细胞
哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/mL。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。
一些哺乳动物细胞的建议工作浓度：
|
细胞 |
种属 |
组织 |
培养基 |
Blasticidin S浓度 (μg/mL) |
|
HeLa |
Human |
Uterus |
DMEM |
3-10 |
|
293 |
Human |
Kidney |
DMEM |
3-10 |
|
B16 |
Mouse |
Melanoma |
RPMI |
3-10 |
|
PC1.0 |
Hamster |
Adenocarcinoma |
RPMI |
10-30 |
操作步骤（哺乳动物稳转株筛选）
Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/mL。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中，在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育，用于筛选稳定转染细胞株。
1）转染后48h，用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代（注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%）。
2）每3-4天去除培养基，加入含抗生素的新鲜培养基。
3）7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要增加一周或更久。
4）转移5-10个耐受克隆到35 mm细胞盘中，加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。
| 分子量 | 458.9 |
| 分子式 | C17H26N8O5.HCl |
| CAS号 | 3513-03-9 |
| 溶解性（25°C） | Water ≥ 10 mg/mL |
| 储存条件 |
粉末型式 -20°C 3年；4°C 2年 溶于溶剂 -80°C 6个月；-20°C 1个月 |
| 运输方式 | 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。 |
*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。
| Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.1791 mL | 10.8956 mL | 21.7912 mL |
| 5 mM | 0.4358 mL | 2.1791 mL | 4.3582 mL |
| 10 mM | 0.2179 mL | 1.0896 mL | 2.1791 mL |
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 | |
| 重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
| 体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
| Km 系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
| 动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
| 动物 A的Km系数 |
例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数（3），再除以大鼠的Km系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
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